Sığrlarda Embryo Transferi

Sığrlarda Embryo Transferi
Prof.Dr.Serhat Pabuccuoğlu
BİYOTEKNOLOJİ NEDİR?
Canlılar aracılığı ile ürün ve
hizmet üretmektir
Reprodüktif Biyoteknolojinin
Amacı
Canlılarda in vivo ve in vitro koşullarda
gen kaynaklarının uzun süreli
korunması ve daha fazla sayıda yavru
elde etmek
Beklenen Faydalar
• Yaşam içinde damızlıklardan daha
fazla yavru elde edebilme
• Zorunlu kesime giden damızlıklardan
kesim sonrası damızlık olarak
faydalanabilme
• Gen transferi ile biyoreaktör üretimi,
klonlama gibi BİYOTEKNOLOJİK
yöntemleri uygulayabilme
EMBRİYOLARLA İLGİLİ
REPRODÜKTİF BİYOTEKNOLOJİ
KONULARI







EMBRİYOLARIN DONDURULMASI
KİMERİSMUS
İDENTİK İKİZLİK
EMBRİYOLARIN İN VİTRO ÜRETİMİ
CİNSİYET TAYİNİ
GEN TRANSFERİ
KLONLAMA
SIĞIRLARDA
EMRİYO TRANSFERİ
SIĞIRLARDA EMBRİYO TRANSFERİ
NE AMAÇLA YAPILIR?
• Kıymetli damızlıklardan daha fazla yavru
elde edebilmek
• Eldeki sürünün ıslahında ve safkan
damızlıklara dönüştürülmesinde
yararlanmak
• Hayvan ıslahı çalışmalarına hız kazandırmak
• Cinsiyeti önceden belirlenmiş embriyoların
transferi ile doğrudan damızlık olarak
kullanılabilecek dişi yavru elde etmek
SIĞIRLARDA EMBRİYO TRANSFERİ
UYGULAMASININ AŞAMALARI
• Verici (Donor) ve Alıcı (Recipient) hayvanların
seçimi
• Alıcı ve Verici ineklerin östrus senkronizasyonu
• Vericilerde süperovulasyon [multiple ovulasyon
(MOET)]
• Vericilerde uterus yıkaması ile embriyoların elde
edilmesi
• Elde edilmiş embriyolardan sağlıklı, transfer
edilebilir olanların seçilmesi ve transfer için
hazırlanması
• Embriyoların alıcı hayvanların uteruslarına transfer
edilmesi
SÜPEROVULASYON AMACIYLA
KULLANILAN HORMONLAR
FSH
PMSG
HMG
ÖRNEK SÜPEROVULASYON TEDAVİ
PROTOKOLU
UYGULAMA
HORMONLAR
GÜNLER
PGF2a
0. gün
1. enj.
FSH
HMG
PMSG
PMSG + Anti
PMSG
2500 IU
2500 IU
8. gün (sabah)
5 mg
8. gün (akşam)
5 mg
375 IE FSH
9. gün (sabah)
5 mg
375 IE FSH
9. gün (akşam)
5 mg
375 IE FSH
10. gün (sabah)
5 mg
375 IE FSH
10. gün (akşam)
5 mg
375 IE FSH
5 mg
375 IE FSH
11. gün (akşam)
5 mg
375 IE FSH
14. gün (sabah)
ST
ST
ST
ST
14. gün (akşam)
ST + hCG
ST + hCG
ST + hCG
ST + Anti PMSG
ST
ST
ST
ST
yıkama
yıkama
yıkama
yıkama
11. gün (sabah)
15. gün (öğle)
21. gün
2. enj.
ALICI VE VERİCİ HAYVANLARDAKİ
ÖSTRUS SENKRONİZASYONU
VERİCİLERDEKİ PROSTAGLANDİN ENJEKSİYON GÜNLERİ
0. gün
11. Gün sabah
Östrus takibi ve tohumlama
48. saat
ALICILARDAKİ PROSTAGLANDİN ENJEKSİYON GÜNLERİ
0. gün
11. Gün akşam
veya 12. gün sabah
Östrus takibi
48. saat
YIKAMA ÖNCESİ OVARYUM
KONTROLU
DOĞAL ÖSTRUSTA GELİŞMİŞ BİR
FOLLİKÜL VE SİKLİK KORPUS LUTEUM
SİKLUSUN 6. GÜNÜNDE GELİŞMEKTE
OLAN KORPUS LUTEUM
SÜPEROVULASYON OLUŞTURULMUŞ
BİR İNEKTE OVARYUM REAKSİYONU
SÜPEROVULASYON OLUŞTURULMUŞ
İNEKTE OVARYUMUN GÖRÜNÜMÜ
SÜPEROVULASYON OLUŞTURULMUŞ
İNEKTE OVARYUMLARIN
GÖRÜNÜMÜ
YIKAMA KATETERLERİ
YIKAMA KATETERİNİN
YÖNLENDİRİLMESİ
YIKAMA KATETERİNİN UTERUS
İÇİNE YERLEŞTİRİLMESİ
YIKAMA KATETERİNİN UTERUS
İÇİNE YERLEŞTİRİLMESİ
UTERUS YIKAMA SIVISININ
TOPLANMASI
(Ada Çiftliği- Beylikdüzü, İstanbul; 1987)
EMBRİYOLARIN SEDİMENTASYONU
SONRASI ÜST YIKAMA SIVISININ
AYRILMASI
(Ada Çiftliği - Beylikdüzü, İstanbul; 1987)
ÇÖKELTİYİ İÇEREN YIKAMA SIVISININ
SAAT CAMLARINA AKTARILMASI
(Ada Çiftliği - İstanbul Beylikdüzü; 1987)
FİLTRE KULLANILARAK EMBRİYOLARIN
YIKAMA SIVISINDAN KAZANILMASI
Uterus yıkaması sonrası elde edilen sıvı
Embriyo filtresi
GENİŞLEMİŞ (EXPANDED) BLASTOSİST
VE MORULA AŞAMASINDAKİ SIĞIR
EMBRİYOLARI
HATCHING (ZONADAN ÇIKAN)
BLASTOSİST VE DİĞER AŞAMALARDAKİ
EMBRİYOLAR
zonadan çıkan
(Hatching)
blastosistler
EMBRİYO TRANSFER PİPETİ
EMBRİYO TRANSFER KATETERİ
TÜRKİYE’DE İLK EMBRİYO TRANSFERİ
UYGULANAN İNEK
(İstanbul Beylikdüzü, Ada Çiftliği-1985)
TÜRKİYE’DE EMBRİYO TRANSFERİNDEN
DOĞAN İLK BUZAĞI
(İstanbul Beylikdüzü, Ada Çiftliği-1985)
EBMRİYO TRANSFER UYGULAMASINDAN
DOĞAN BUZAĞILAR
(TİGEM İNANLI İŞLETMESİ, MURATLI-TEKİRDAĞ-1987)
Kaynak: Dr. M.E.Cumhur SÖNMEZ doktora tezi-1990
EBMRİYO TRANSFER UYGULAMASINDAN
DOĞAN BUZAĞILAR
(TİGEM İNANLI İŞLETMESİ, MURATLI-TEKİRDAĞ-1987)
Kaynak: Dr. M.E.Cumhur SÖNMEZ doktora tezi-1990
EBMRİYO TRANSFER UYGULAMASINDAN
DOĞAN BUZAĞI (ırklar arası transfer)
(İstanbul Beylikdüzü, Ada Çiftliği-1988)
EBMRİYO TRANSFER UYGULAMASINDAN
DOĞAN BUZAĞILAR
(İstanbul Beylikdüzü, Ada Çiftliği-1989)
EBMRİYO TRANSFER UYGULAMASINDAN
DOĞAN BUZAĞI
(ırklar arası transfer)
(İstanbul Beylikdüzü, Ada Çiftliği-1989)
ZİGOT AŞAMASINDAKİ BİR
EMBRİYO
İKİ BLASTOMERLİ BİR EMBRİYO
DÖRT BLASTOMERLİ BİR
EMBRİYO
GELİŞİMİNİN 8 BLASTOMER VE
MORULA AŞAMASINDAKİ
EMBRİYOLAR
GELİŞİMİNİN HATCHİNG (ZONADAN
ÇIKAN) BLASTOSİST AŞAMASINDA BİR
EMBRİYO
ZONADAN ÇIKMIŞ (HATCHED) BİR
BLASTOSİST
ZONADAN ÇIKMIŞ (HATCHED) BİR
BLASTOSİST VE BOŞ ZONA
BLASTOSİST AŞAMASINDAKİ
SIĞIR EMBRİYOSU
GENİŞLEMİŞ (EXPANDED) BLASTOSİST
AŞAMASINDA SIĞIR EMBRİYOSU
Embryolarda mikro cerrahi
uygulaması ile ikizlik
oluşturulması
MİKROMANİPLATÖR
EMBRİYOLARA
MİKROCERRAHİ
YÖNTEMİNİN
UYGULANIŞI
EMBRİYOLARA MİKROCERRAHİ
YÖNTEMİNİN UYGULANIŞI
EMBRİYOLARA MİKROCERRAHİ
YÖNTEMİNİN UYGULANIŞI
EMBRİYOLARA MİKROCERRAHİ
YÖNTEMİNİN UYGULANIŞI
EMBRİYOLARA MİKROCERRAHİ
YÖNTEMİNİN UYGULANIŞI
EMBRİYOLARA MİKROCERRAHİ
YÖNTEMİNİN UYGULANIŞI