adli dna analizleri

ADLİ DNA ANALİZLERİ
İ B R A H I M S E M İ Z O Ğ LU
EKİM 2013
ANKARA
ADLİ BİLİMLER
Locard ’ın değişim prensibi:
« Her temas bir iz bırakır.»
Locard ’a göre, suçlu olan kişi bir obje veya kişi ile temas ettiğinde, olay ile ilgili kanıt
olabilecek “ iz ” bırakır.
Suçlu kişi olay yerinden, olayla bağlantı oluşturabilecek “ iz ” leri (toz ve partükül vb.) taşır.
ADLİ BİLİMLER
Adli bilimler terimi adli konularda çoğu özel uzmanlık eğitimini ve bilgisini gerektiren incelemeleri
yapan bilim dallarının oluşturduğu kümeyi ifade eder.
ADLİ BİLİMLER
ADLİ DNA ANALİZLERİ
Olay yerinde tespit edilen deliller ile olaya dahil olan kişilerin irtibatının sağlanarak suç olaylarının aydınlatılması
için biyolojik delillerden elde edilen DNA molekülü üzerinde yapılacak olan bilimsel çalışmaları kapsar.
TARİHÇE
İNGİLTERE;
1988 yılında, DNA ilk defa tek başına delil olarak kabul edildi. 15 yaşlarındaki 2 genç kızın (Lynda Mann –
Dawn Ashworth) katilinin (Colin Pitchfork) bulunmasında kullanıldı.
ABD;
1987’de DNA delil olarak kabul edildi, 1988’de 4 kadının tecavüz edilerek öldürülmesi olaylarının failinin
aynı kişi olduğu tespit edildi. Mahkum elektrikli sandalyede idam edildi.
TARİHÇE
ORGANİZASYON
BAŞBAKANLIK
Üniversiteler
Adli Tıp Anabilim Dalları
İçişleri
Bakanlığı
Adalet
Bakanlığı
Adli Tıp Kurumu
(Ankara,
Istanbul, Izmir)
KPL
(Ankara,
Istanbul )
JKL
(Ankara)
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU
DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR
ELEKTROFOREZ
TİPLENDİRME
RAPOR
DELİL İNCELEME
Canlıların vücutlarından kopan, düşen veya akan her türlü bulguya
“BİYOLOJİK DELİL” denir.
DELİL İNCELEME
MAKROSKOBİK
UV IŞIK
MİKROSKOBİK
LUMİNOL
TANIMLAMA
NUMUNE
ALMA
UV IŞIK İNCELEMESİ
UV IŞIK İNCELEMESİ
LUMİNOL
TANIMLAMA
İhtimali Test Reaktifleri
Doğrulama Testleri
İHTİMALİ TEST REAKTİFLERİ
KAN;
Katalitik testlerdir.
Hemoglobinin ‘hem’ grubunun peroksidaz benzeri bir aktivite göstererek, hidrojen peroksiti (H2O2)
parçalaması temeline dayanır.
Bu tepkimede oluşan yükseltgenmiş (okside) türler çeşitli substralar ile tepkimeye girerek gözle görülebilen
bir renk değişimi meydana getirir.
İHTİMALİ TEST REAKTİFLERİ
KAN;
İhtimali Kan Testleri
Test
Guaiacum / Van Deen's'Test
Day's Test
Aloin
Phenolphthalin / Kastle-Meyer Test
Benzidine / Adlers' Test
Leucomalachite Green
o-Tolidine
o-Toluidine
o-Dianisidine
Tetramethylbenzidine (TMB)
Luminol
Fluorescin
Confirmatory Crystal Tests
Reagent and/or Name of Test
Hematin halide / Teichmann's Test
Pyridine hemochromogen /
Takayama's Test
Acetone Chlorhemin / Modified Teichmann
Confirmatory Anti-Human Hemoglobin Tests
Orijinal Makale Yazarı ve yılı
Van Deen, 1862
Day, 1867
Klunge, 1882
Kastle & Shedd, 1901; Meyer, 1903; Utz, 1903; Higaki and Philp, 1976
Adler & Adler, 1904
Adler & Adler, 1904
Ruttan & Hardisty, 1912
Gershenfeld, 1939
Owen et al., 1958
Holland et al., 1974; Garner et al., 1976
Specht, 1937
Lee et al., 1979
Original Author(s), Year *
Teichmann, 1853
Takayama, 1912
Wagenaar, 1935
Klein, 1905; Hektoen & Schulhof, 1923; Heidelberger & Landsteiner, 1923; Baxter & Rees, 1974
İHTİMALİ TEST REAKTİFLERİ
MENİ;
Katalitik testlerdir.
Asit Fosfataz enziminin naftil fosfatın fosfat grubunu parçalaması temeline dayanır.
İHTİMALİ TEST REAKTİFLERİ
TÜKÜRÜK;
Alfa Amilaz enziminin aktivitesi temeline dayanır.
DOĞRULAMA TESTLERİ
Antijen - Antikor Hibridizasyonu temeline dayanır.
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU
PCR
ELEKTROFOREZ
TİPLENDİRME
RAPOR
DNA İZOLASYONU
Patlat-Ayır-Geri al
KİMYASAL YÖNTEMLER
KOLON YÖNTEMLERİ
MANYETİK PARÇACIK YÖNTEMLERİ
KİMYASAL YÖNTEMLER
Fenol –Kloroform Yöntemi
(Organik Yöntem)
KİMYASAL YÖNTEMLER
CHELEX Yöntemi
KOLON YÖNTEMİ
MANYETİK PARÇACIK YÖNTEMİ
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU
DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR
ELEKTROFOREZ
TİPLENDİRME
RAPOR
DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR TEMELLİ OLMAYAN YÖNTEMLER
PCR TEMELLİ YÖNTEMLER
DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR Temelli Olmayan Yöntemler
Spektrofotometre
Agaroz Jel Elektroforezi
Kemiluminisans ve Fotometrik
DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR Temelli Yöntemler
Real Time PCR
AB Quantifiler Duo DNA Miktar Tayin Kiti
Promega Plexor HY DNA Miktar Tayin Kiti
QIAGEN İnvestigator Quantiplex DNA Miktar Tayin Kiti
AB Quantifiler Duo DNA Miktar Tayin Kiti
Promega Plexor HY DNA Miktar Tayin Kiti
QIAGEN İnvestigator Quantiplex DNA Miktar Tayin Kiti
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU
DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR
ELEKTROFOREZ
TİPLENDİRME
RAPOR
PCR
MULTİPLEKS PCR
PCR
MULTİPLEKS PCR
Ülkemizde Yaygın Olarak Kullanılan STR
Multipleks Kitler
AB AmpFlSTR Identifiler Plus Multipleks Amplifikasyon Kiti
Promega PowerPlex 16 HS Multipleks Amplifikasyon Kiti
QIAGEN İnvestigator ESSplex Plus Multipleks Amplifikasyon Kiti
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU
DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR
ELEKTROFOREZ
TİPLENDİRME
RAPOR
ELEKTROFOREZ
Kapiller Elektroforez
ELEKTROFOREZ
•Yürütme işlemi 15 kV ’da (15.000 V) ve 60 °C’de yaklaşık 45 dakikada tamamlanır.
•Tampon olarak kullanılan 1 X TBE (Tris-borat-EDTA) yüksek voltajda
hızlı bir elektroforez için tercih edilmektedir.
•POP4 polimeri, %4 DMA (poly [N,N-dimetilakrilamid=DMA], 8M üre, %5 2-pirolidinon ve 100 mM NTris-metil-3-aminopropan-sülfonik asid (TAPS)’dan oluşur.
POP4 polimeri içinde bulunan yüksek üre miktarı elektroforez sırasında PCR ürünlerindeki denatürasyon
durumunun devamını da sağlar.
ELEKTROFOREZ
ELEKTROFOREZ
ELEKTROFOREZ
ELEKTROFOREZ
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU
DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR
ELEKTROFOREZ
TİPLENDİRME
RAPOR
TİPLENDİRME
Allelik Ladder;
İnsan populasyonuna özgü STR bölgelerinin ortak allellerin olduğu yapay bir karışımdır. Her bir
allel için referans DNA büyüklüğünün belirlenmesinde kullanılır. Bu allelik ladderlar, her STR lokusu için
bir ölçme birimine benzer standart vazifesini görmektedir.
TİPLENDİRME
TİPLENDİRME
Size Marker;
Büyüklüğü bilinen yapay DNA parçacıklarıdır. Her bir örnek için bilinmeyen DNA parçacıklarının
büyüklüklerinin belirlenmesinde kullanılır. (ILS 600,LIZ 500,ROX 350)
TİPLENDİRME
TİPLENDİRME
TİPLENDİRME
TİPLENDİRME
TİPLENDİRME
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU
DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR
ELEKTROFOREZ
TİPLENDİRME
RAPOR
RAPOR
Teşekkür ederim.
[email protected]