Archem HbA1c Direct V.2.5 TR

HbA1c DIRECT
HbA1c DİREK TURBİDİMETRİ
İnsan tam kanındaki HbA1c (%)’nin kantitatif turbidimetrik tayin testidir.
Sıvı reaktifler. 2°C - 8°C’de saklayınız. Dondurmayınız. İnvitro diagnostik kullanım içindir.
Ref No
HB700
HB701
HB702
01R87-51
01R87-41
01R87-21
01R87-31
Ambalaj
80 mL
60 mL
40 mL
2286 Test
1143 Test
571 Test
826 Test
Ref No
RHB1
RHB2
NHB1
NHB2
KHB1
KHB2
KHB3
Ambalaj
2286 Test
754 Test
552 Test
414 Test
696 Test
2783 Test
1043 Test
Ref No
SHB1
SHB2
MHB1
MHB2
LHB1
DHB4
DHB2
Ambalaj
490 Test
343 Test
2727 Test
1091 Test
2087 Test
220 Test
1353 Test
Ref No
LHB3
LHB4
BY9000
BY9001
RDB3
EH11
EH12
Ambalaj
522 Test
348 Test
2573 Test
1715 Test
150 Test
400 Test
200 Test
* 01R87-51 / 01R87-41 / 01R87-21 / 01R87-31 Ref Numaralı Ürünler Abbott Architect Biyokimya Otoanalizör
Serileri için Üretilmiştir.
KULLANIM AMACI
Archem HbA1c assay oto analizörle tam insan
kanındaki HbA1c’nin (hemoglobin fraksiyon) klinik
laboratuar ortamında kantitatif in vitro tayinidir.
HbA1c assay uzun dönem glikoz kontrolünün ve
bireylerin
diabetes
mellitus’a
uyumunun
gözlenmesine yardımcı olması için istenmektedir.
Archem HbA1c assay’in diyagnostik diabetes
mellitus için kullanılması istenmemektedir.
ÖZET VE TESTİN AÇIKLANMASI
Archem HbA1c assayi toplam hemoglobin
konsantrasyonu (THb) ile HbA1c konsantrasyonu
arasındaki ilişkiyi ölçer.
Diabetes mellitus hastalığı teşhis edilmiş bireylerde
HbA1c yüzdesi artışı bulunmuştur. Kontrol
edilmemiş diabetler hiper glisemi ve ketozun akut
komplikasyonlarına öncül olabilir. Ek olarak, uzun
dönem komplikasyonlar (kalp damar rahatsızlığı,
retinopati, nefropati, nöropati) olabilir. Diyabet
Kontrolü ve Komplikasyon Denemeleri (Diabetes
Control and Complications Trial (DCCT))’nin de
içinde bulunduğu çeşitli çalışmalar diabetin uzun
dönem kontrolünün bu komplikasyonları önlediğini
göstermiştir. Bu yüzden, HbA1c yüzdesinin ölçümü
diyabet hastalarında uzun dönem glisemik
kontrolün
gözlenmesinde
paha
biçilemez
olabilmektedir.
Archem HbA1c assayin, uygulamada antibody
kullanıldığından beri labil HbA1c ile çapraz
reaktiviteye sahip olmaması HbA1c’nin ketoamin
formu için spesifiktir. Stabil HbA1c fizyolojik
faktörlerdeki hızlı değişimlere cevap olarak yükselip
alçalma göstermez ve bu yüzden bireylerin birkaç
aylık
ortalama
kan
glikoz
seviyelerinin
ölçülebilmesini sağlar.
Rev. V2.5 Date: 09.14
HbA1c ve GÜNLÜK Glucose seviyesi arasındaki
korelasyon
HbA1c (%) Gluc. (mg/dL) Gluc. (mmol/L)
5
97
5,4
6
126
7
7
154
8,6
8
183
10,2
9
212
11,8
10
240
13,4
11
269
14,9
12
298
16,5
Değerler NGSP’nin global web sitesinden
alınmıştır 2013-2014
TEST PRENSİBİ
Hemoglobin A1c American Diabetes Association
(ADA) tarafından önerilen önemli bir testtir ve
kullanışlılığı United Kingdom Prospective Diabetes
Study (UKPDS) ve Diabetes Control and
Complications
Trial
(DCCT)
tarafından
aydınlatılmıştır. Halihazırda HbA1c testi her 2-3
ayda Diyabet idare programının bir parçası olarak
diyabet hastaları için önerilir. Glikohemoglobin
hemoglobindeki amin gruplarına non-enzimatik
glikoz eklenmesi ile üretilmektedir. HbA1c
hemoglobinin beta zincirlerindeki N-ucu valin
kalıntılarındaki glikoz modifiye hemoglobin A
(HbA)’yı spesifik olarak işaret etmektedir. HbA1c
testi hem ortalama glisemi indeksi, hem de diyabet
komplikasyonlarının gelişme riskinin ölçülmesi için
kullanılmaktadır. Bu yüzden HbA1c testi önceki 2- 3
aydaki glisemik kontrolün iyi bir indikatörüdür.
HBA1c DIRECT TURBIDIMETRY Page 1 / 5
NUMUNE TOPLAMA VE KULLANMA
Bu metot tam kanda HbA1c’yi direk saptamak için
antijen ile antibody etkileşimini kullanır. Toplam
hemoglobin ve HbA1c lateks parçacıklarına aynı
spesifik olmayan absorbsiyon oranına sahiptir. Fare
anti insan HbA1c monoklonal antibody eklendiğinde
(R2), lateks-HbA1c-fare anti insan HbA1c antibody
kompleksi oluşur. Keçi anti fare IgG poliklonal
antibody
etkileşiminde
aglütinasyon
olur.
Aglutinasyon miktarı lateks parçacıklarının yüzeyine
absorbe olmuş HbA1c ile orantılıdır. Aglutinasyon
miktarı absorbans ile ölçülür. HbA1c değeri
kalibrasyon eğrisinden bulunur.
Assay insan tam kan örnekleri için formüle
edilmiştir. EDTA antikoagülanı ile toplanmış venöz
tam kan örnekleri kullanılabilir. Numunelerin
toplanıp dolaba koyulmasından itibaren iki hafta
içinde kullanılmaları önerilir. Test için öncelikli
olarak, eritrositleri harekete geçirmek için tam kan
örnekleri nazikçe çevrilerek karıştırılmalı.
Oto analizör kullanımı: Numuneler, çökelti
oluşumunu önlemek için Stat Mode’da
(Emergency mode) test edilmelidir.
• Hemoglobin çeşitleri HbA2, HbC ve HbS bu
metodla interferans göstermez.
TEST PROSEDÜRÜ
TEST PARAMETRELERİ
1) 250 µL Lysis reaktifini örnek içerisine ya da
Eppendorf microfuge tüpü içerisine hazırlayınız.
Metot
Dalga boyu
Sıcaklık
Numune
Lineerite
: Immunoturbidimetrik
: 660 nm
: 2-8ºC
: EDTA’lı tam kan
: 4% - 16% (NGSP)
REAKTİF BİLEŞENLERİ
Lyse
Reaktifi
Stabilizers
Buffers,
lysing
agent,
water
Reaktif R1
Reaktif R2:
Latex: <
0,15 %
Buffer
Stabilizers.
Mouse anti-human
HbA1c monoclonal
antibody< 0.06mg/ml,
goat anti-mouse IgG
polyclonal antibody <
0.09mg/dl, Buffer,
stabilizers.
Gerekli fakat Sağlanmamış Materyaller
1) HbA1c kalibrator
Turbidimetric
HbA1c
kullanılması istenen)
seti (sadece Direct
Assay
reaktifleri
ile
Tam Kan Bench Top Lizis Prosedür
2) Test için öncelikle, tam kan örnekleri eritrositleri
harekete geçirmek için en az 5 kez nazikçe
çevrilerek karıştırılmalıdır. Tam kan testten önce
karışmamışsa assayin doğruluğu etkilenecektir.
5 µL Lysis buffer örnek kabı içerisinde ya da
mikrofüj tüpünde tam kan hücresi ile tamamen
tekrar süspanse edilir. Uygun bir pipetajla köpük
oluşturmadan
nazikçe
karıştırınız
ve
oda
sıcaklığında 5-10 dakikalığına, tamamen kırmızı
kan hücrelerinin lizis olması için inkübe ediniz.
Tamamlanmış lizis, karışım herhangi partikül
içermeyen koyu kırmızı renkte net bir solüsyon
olduğunda gözlenir. Hemolizat preparasyonunun
tamamlandığından emin olmak için ihtiyaç
duyulursa inkübasyon süresi uzatılabilir. Hazırlanan
lizat Direct Turbidimetric HbA1c assayinin adımları
için kullanıma hazırdır ve 7 günden fazla 2-8 °C’de
stabildir.
3) Kalibratörler ve kontroller hasta örnekleri gibi tam
olarak işlenmeli ve her biri için etiketteki
yönergelere uyulmalı.
2) 2 seviye HbA1c kontrolleri (tam kan hemolizat ve
sabitleyici) (Cat No: HBCN01 (01R96-01))
ANALİZÖRLER İÇİN ASSAY ŞEMASI
REAKTİF HAZIRLAMA
Analizörler için, sadece 2 reaktif kullanılabilir.
Aşağıdaki şemayı analizör aplikasyonu için genel
hat olarak kullanınız. Not: HbA1c end point
assayidir ve ilk okuma noktası A1 R2 eklenmeden
hemen öncedir.
R1: Sıvı, kullanım için hazır.
R2: Sıvı
Lyse Reaktifi: Sıvı, kullanım için hazır.
REAKTİF STABİLİTESİ VE SAKLAMA
2-8°C’de reaktifler son kullanma tarihine kadar
stabildir.
Hazırlanarak yapısı geri kazandırılmış R2ab 1 ay
boyunca 2-8°C’de saklandığında stabildir. R1 ve R2
reaktifleri ışığa duyarlıdır.
Rev: V.2.5 Date 09.14
HBA1c DIRECT TURBIDIMETRY Sayfa 2 / 5
KALİTE
KONTROL
Kalibrasyon
VE
KALİBRASYON
Archem Direct Turbidimetric HbA1c assay her hafta
(168 saat) kalibrasyona ihtiyaç duyar. Kalibrasyon
serilerini analizöre en düşükten en yükseğe doğru
yerleştiriniz. Spesifikasyon sayfasındaki belirlenmiş
spesifik değerleri kalibratöre giriniz.
Archem Direct Turbidimetric HbA1c kalibratör
ayarları Hemoglobin A1c Turbidimetric assay
reaktifleri için istenir.
Cat No: HBCL04 (01R97-01)
Bütün kalibratör şişeleri son kullanma tarihlerine
kadar 2-8°C arasında saklandığında stabildir.
Archem HbA1c kalibratör seti liyofilize formda
bulunur. Otoanalizörler için Archem HbA1c
calibrator seti cihaz üstü Lysis Aplikasyonu 4 seviye
kalibratör materyali içerir. Level 1-4 seviyeler
liyofilize formdadır. Liyofilize içeriği her bir etiketteki
talimata göre sulandırıp nazikçe karıştırınız.
Kullanmadan önce şişelerin 30 dakika oda
sıcaklığına gelmelerini sağlayınız. Yapısı geri
kazandırılmış kalibratörler 14 gün boyunca, sıkı
kapatıldığı takdirde 2-8°C’de stabil olarak
saklanabilir.
Önerilen Değerler: diyabet olmayanlar için
%6.5’dan az (Bu değer NGSP regülasyonuna göre
2013’te düzenlenmiştir), diyabetli ya da hamile
kişilerin glisemik kontolü için %7’den az. Yani,
hasta kendisine göre gözlenmelidir. Kan glikoz
seviyesindeki Hemoglobin A1c değişikliklerinde 3-4
haftalık bir duraklama vardır. Diabetik hastaları
gözlemek için hemoglobin A1c sonuçları tek tek
referans aralığı içerisinde olmalıdır.
Klinik tanı sadece test sonuçlarının bulguları ile
yapılmamalıdır, aynı zamanda klinik ve laboratuar
verileri ile birleştirilmelidir.
*Her laboratuar
saptamalıdır.
The International Federation of Clinical Chemistry
(IFCC)
değerleri
aşağıdaki
formüle
göre
hesaplanabilir.
Dönüşüm formülü:
NGSP% = [0.915 x (IFCC) mmol/mol] + 2.15.
REFERANS ARALIĞI (NORMAL DEĞERLER)
(CLSI C28-P Belgesine Göre)*
Beklenen Değerler: %4.5 - %6.5 (NGSP/DCCT)
Beklenen Değerler: 26-48 mmol/mol (IFCC)
Beklenen Değerler: %4.5-%7(Diyabetikler)
(NGSP/DCCT)
Rev: V.2.5 Date 09.14
değerlerini
•
Assayin lineeritesi %16 HbA1c’ya kadardır.
Değerleri %16 altında bulunan numuneler dilue
edilmemeli ve tekrar test edilmemelidir. Bunun
yanında %16 (>16%) üzerinde bulunan değerler
raporlanmalıdır.
•
Alkolik, yüksek dozda asetil salisilik asite sahip,
uyuşturucu ilaç kullanan, başta zehirlenmiş
hastaların
tutarsızlık
sergileyebileceği
gözlenmiştir.
•
Bu assay EDTA içerisine tam kan örneklerinin
kullanımı için formüle edilmiştir.
•
HbF’nin yüksek seviyeleri HbA1c’nin yetersiz
değerlendirilmesine
neden
olabilir,
üremi
immünoassayle HbA1c saptanması ile interfere
olmaz. Kararsız ara ürünler (Schiff baz)
algılanmaz ve bu yüzden immünoassay ile HbA1c
saptanmasına interferans göstermez.
•
Hemoglobinin diğer nadir rastlanan çeşitleri (Örn:
HbE) değerlendirmeye tabi tutulmamıştır.
Kalite kontrolün kafi olduğundan emin olmak için,
değerleri bilinen seviye 1 ve seviye 2 kontrolleri
bilinmeyen örnekler gibi çalışılmalıdır.
Uygun kalibrasyon eğrisi (kalibratör her bir %HbA1c
seviyesi için değerlere sahiptir) kullanılarak, HbA1c
konsantrasyonu %HbA1c olarak ifade edilir.
Raporlanan değerler Diyabet Kontrol ve Klinik
Denemeleri sistemi (Diabetes Control and Clinical
Trials (DCCT) system) ile hizalanır, bu yüzden
NGSP% formatında raporlanır. Herhangi bir
hesaplama adımına ihtiyaç duyulmaz.
beklenen
SINIRLAMALAR
Kalite Kontrol
Archem Direct Turbidimetric HbA1c kontrol seti tek
başına satın alınabilir. Kullanıcılar aplikasyon
föylerini takip ederek harici kalite kontrol problemleri
ve biyo-bozunuma uğrayabilecek maddeleri idare
etmelidir.
kendi
PERFORMANS KARAKTERİSTİKLERİ
(Hitachi 917 kimya analizöründe saptanmıştır)
Aşağıdaki HbA1c değer verileri Archem Direct
Turbidimetric HbA1c assayinin pazarlanan HPLC
metotları ile kıyaslanmasıyla elde edilmiştir.
Tam kan uygulaması
n
44
Eğim
1.0212
Intercept
0.0135
Korelasyon katsayısı
0.9874
Değer aralığı
5% - 13% HbA1c
Düşük/Yüksek Lineerite: Archem HbA1c assay
2% - 16.0% arasında lineerdir.
HBA1c DIRECT TURBIDIMETRY Sayfa 3 / 5
Kesinlik Çalışmaları (CLSI EP5 Belgesine Göre):
Tekrarlanabilirlik (Gün içi) (intra-assay):
İki kan örneğinin Hirachi 917’de NCCLS
protokolü olan EP5 çalışılarak saptanmıştır.
Seviye Ort.
Düşük 5.46
Yüksek 10.1
Std. Dev.
0.074
0.169
% C.V.
1.45
1.73
Tekrar çalışılabilirlik (Günden güne)
(inter-assay): Günler arası kesinlik iki kan
örneğinin Hitachi 917’de NCCLS protokolü
olan EP5 çalışılarak saptanmıştır.
Seviye Ort.
Düşük 5.46
Yüksek 10.1
Std. Dev.
0.156
0.268
%C.V.
2.81
2.72
Doğruluk: Bu reaktiften elde edilen sonuçlar
referans reaktifle karşılaştırıldığında, sistematik
farklılıklar görülmemiştir. Karşılaştırma deneylerinin
detaylarına istek doğrultusunda ulaşılabilir.
İnterferans
Assay
aşağıdaki
konsantrasyonları
interfere maddelerden etkilenmezler:
verilmiş
Ascorbic acid 40 mg/dL,
Total bilirubin 48 mg/dL,
Acetylated Hb 4,8 mmol/L,
Triglyceride 2000mg/dl,
Carbamylated Hb 7,3 mmol/L.
Stabil glycated hemoglobin Archem Direct
Turbidimetric
HbA1c
assay’de
kullanılan
Turbidimetrik reaksiyona substrat olarak hizmet
eder.
NOT
Eğer bazı örneklerin enfeksiyon taşıma ihtimali
varsa; insan numuneleri ve örneklerle etkileşimde
olan tüm materyallerle ilgilenilmeli bölgesel ve
ulusal yasalara göre bertaraf edilmelidir.
1) R1 ve R2 reaktifleri ışığa duyarlıdır, karanlık bir
yerde saklayınız.
2) İnsan kaynaklı materyaller içeren numuneler
potansiyel enfektöz olması sebebiyle güvenli
laboratuar
prosedürleri
(Örn:
Biosafety
in
Microbiological and Bio-medical Laboratories (HHS
Publication
Number
[CDC]
93-8395))
kullanılmalıdır.
3) Herhangi bir diagnostik test prosedürü için,
sonuçlar diğer tüm test sonuçları ve hastaların klinik
statüsü düşünülerek yorumlanmalı.
4) Yemekten, deri ve gözlerden sakınınız. Materyal
Güvenlik Bilgileri Belgesine bakınız.
5) Reaktifleri dış kutunun etiketindeki son kullanma
tarihinden sonra kullanmayınız.
Rev: V.2.5 Date 09.14
6) Kullanım ve saklama konusunda ek güvenlik
bilgileri bu ürünün Materyal Güvenlik Bilgileri
sayfasından edinilebilir.
ÖNLEMLER
Reaktif bazı non-reaktif ve koruyucu bileşenler
içerebilir. Dikkatli bir şekilde kullanılması, deri ve
boğazla
etkileşiminden
kaçınılması
tavsiye
edilmiştir. Testi genel GLP yönergelerine göre
uygulayınız.
ABBREVIATIONS
CLSI : Clinical and Laboratory Standards Institute
CV% : Coefficient of Variation Percentage
EP
: Evaluation Protocols
GLP
: Good Laboratory Practice
IU
: International Unit
mA
: Miliabsorbans
mL
: Mililitre
NCCLS : National Committee for Clinical Laboratory
Standards
QC
: Quality Control
REFERANSLAR
1. IFCC reference system for measurement of
hemoglobin A1c in human blood and the
National Standardization Schemes in the
United states, Japan and Sweden: a method
comparison study, Clinical chemistry (2004)
50:1,pg: 166-174.
2. Eric S Kilpatrick, J Clin Pathol 2000; 53:335339.
3. H.B. Chandalia and P. R. Krishnaswamy,
Glycated Hemoglobin, Current Science Vol. 83,
No. 12, 25 December 2002
4. American Diabetes Association. Clinical
practice recommendation: standards of medical
care for patients with diabetes mellitus. Diab
Care 22 ( supp): S32-41 (1999)
5. American Diabetes Association Clin. Practice
recommendation, 1992, Diab Care 16S2 (93):
10-13
6. American Diabetes Association Clin Practice
recommendation, 1993, Diabetes 42: 1555-58
NGSP,
http://www.missouri.edu/~diabetes/ngsp.html
Goldstein et al, Clin Chem 32: B64-B70 (1986)
7. Hoelzel W et al. IFCC reference system for
measurement of hemoglobin A1c in human
blood and the national standardization schemes
in the United States, Japan and Sweden: a
method-comparison
study.
Clin
Chem
2004;50:166-74
8. Sacks, D (ed). Global Harmonization of
Hemoglobin A1c. Clin Chem 51(4): 681-683
(2005) 9.Tietz Textbook of Clinical Chemistry
1999, pg: 794-795.
HBA1c DIRECT TURBIDIMETRY Sayfa 4 / 5
9. Goldstein DE, Little RR, Lorenz RA, Malone JI,
Nathan D, Peterson CM. Tests of glycemia in
diabetes. Diabetes Care. 1995;18:896–909.
10. Goldstein DE, Little RR. More than you ever
wanted to know (but need toknow) about
glycohemoglobin testing. Diabetes Care.
1994;17:938–939.
11. The Diabetes Control and Complications Trial
Research Group.The effect of intensive
treatment of diabetes on the developmentand
progression of long-term complications in
insulin-dependent diabetes mellitus. N Engl J
Med. 1993;329:977–986.
12. Santiago JV. Lessons from the diabetes control
and
complicationstrial.
Diabetes.
1993;42:1549–1554.
13. UK Prospective Diabetes Study (UKPDS)
group. Intensive blood glucose control with
sulfonylureas or insulin compared with
conventional
treatment
and
risk
of
complications in patients with type 2 diabetes
(UKPDS 33). Lancet 1998;352:837–853.
14. Flückiger R, Mortensen HB. Review: glycated
haemoglobins. J Chromatogr 1988;429:279–
292.
15. Goldstein DE, Little RR, Wiedmeyer HM,
England JD, McKenzie EM. Glycated
hemoglobin:
methodologies
and
clinical
applications. Clin Chem 1986;32:B64–B70.
16. Nathan DM, Kuenen J, Borg R, Zheng H,
Schoenfeld D, Heine R. Translating the A1c
Assay Into Estimated Average Glucose Values.
Diabetes Care 2008; 31:1473–1478.
17. Bunn HF, Gabbay KH, Gallop PM. The
glycosylation of hemoglobin: relevance to
diabetes mellitus. Science. 1978;200:21–27.
18. Karl J et al. Development and Standardization
of a New Immunoturbidimetric HbA1c Assay.
Klin Lab 1993;39:991–996.
19. Chang J, Hoke C, Ettinger B, Penerian G.
Evaluation
and
Interference
Study
of
Hemoglobin A1c Measures by Turbidimetric
Inhibition
20. Immunoassay.
Am
J
Clin
Pathol
1998;109(3):274–278.
21. Frank EL, Moulton L, Little RR, Wiedemeyer
HM, Rohlfing C, Roberts WL. Effect of
Hemoglobin C and S Traits on seven
Glycohemoglobin
Methods.
Clin
Chem
2000;46(6):864–866.
22. Kobold U, Jeppsson JO, Duelffer T, Finke A,
Hoelzel W, Miedema K. Candidate reference
methods for hemoglobin A1c based on peptide
mapping. Clin Chem 1997;43:1944–1951.
23. Jeppsson JO, Kobold U, Finke A, Hoelzel W,
Hoshino T, Miedema K, Mosca A, Mauri P,
Paroni R, Thienpont L, Umemoto M, Weykamp
C. Approved IFCC reference method for the
measurement of HbA1c in human blood. Clin
Chem Lab Med 2002;40:78–89.
Rev: V.2.5 Date 09.14
SYMBOLS
IVD
Vücut dışı kullanım için
LOT
Üretim Lotu
R1
Reaktif 1
R2
Reaktif 2
CONC
INGRED
SN
REF
Konsantrasyon
Reaktif Bileşenleri
Seri Numarası
Referans Numarası (Katalog No)
Son Kullanma Tarihi
Saklama Sıcaklık Aralığı
Aplikasyon Föyünü Okuyunuz
Biyolojik Risk
Archem Diagnostics Industry LTD. ŞTİ.
Organize Sanayi Bölgesi, Mutsan Sanayi Sitesi
M8 Blok No: 48 Başakşehir / ISTANBUL TURKEY
Tlf: + 90 212 444 08 92
Fax: +90 212 629 98 89
[email protected]
www.archem.com.tr
HBA1c DIRECT TURBIDIMETRY Sayfa 5 / 5