TPUC3 - Roche

03333825190V10
TPUC3
Total Protein Urine/CSF Gen.3
• Reaktiflerin kullanılabileceği cobas c sistemlerini belirtir
Sipariş bilgisi
Total Protein Urine/CSF Gen.3
150 test
C.f.a.s. PUC (5 x 1 mL)
Precinorm PUC (4 x 3 mL)
Precipath PUC (4 x 3 mL)
Diluent NaCl 9 % (50 mL)
Kat. No. 03333825 190
Kat. No. 03121305 122
Kat. No. 03121313 122
Kat. No. 03121291 122
Kat. No. 04489357 190
Türkçe
Sistem bilgisi
cobas c 311/501 analizörleri için:
TPU3: ACN 708
TPC3: ACN 402
cobas c 502 analizörü için:
TPU3: ACN 8708
TPC3: ACN 8402
Kullanım amacı
İnsan idrar ve beyin-omurilik sıvısında proteinin kantitatif tayini için
Roche/Hitachi cobas c sistemlerinde yapılan in vitro testtir.
Özet
İdrarda protein ölçümü, proteinüri veya albüminüri ile karakterize edilen
böbrek veya kalp hastalıkları ya da tiroid bozuklukları gibi hastalık
durumlarının tanısı ve tedavisinde kullanılır. Beyin-omurilik sıvısında
(BOS) protein ölçümleri menenjit, beyin tümörleri ve merkezi sinir sistemi
enfeksiyonları gibi durumların tanı ve tedavisinde kullanılır.1
Sistem-No 07 6763 8
Kod 489
Kod 240
Kod 241
Sistem-No 07 6869 3
Önlemler ve uyarılar
In vitro tanıda kullanım için.
Tüm laboratuvar reaktiflerinin kullanılmasında gerekli olan
genel önlemleri uygulayın.
Bu kit 1999/45/EEC sayılı Avrupa direktifine göre aşağıdaki
şekilde sınıflandırılan bileşenler içerir:
C - Aşındırıcı
R34, S26, S37/39, S45 (reaktif R1 içinde sodyum hidroksit)
Yanıklara neden olur. Gözlerle temas etmesi durumunda, derhal bol miktarda
su ile yıkayın ve tıbbi yardım isteyin. Uygun eldiven ve göz/yüz koruması
kullanın. Kaza durumunda veya kendinizi iyi hissetmiyorsanız, derhal tıbbi
yardım isteyin (mümkün olduğunda bu bilgiyi gösterin).
Dikkat. Tahriş edici. Şişe 2 benzetonyum klorür içerir. Gözlere, cilde ve
mukozaya temasından kaçının. Temas etmesi durumunda, etkilenen
alanları bol miktarda su ile yıkayın. Gözlere temas etmesi veya
yutulması durumunda derhal tıbbi yardım alın.
İrtibat telefonu: tüm ülkeler: +49-621-7590
Profesyonel kullanım için talep edildiğinde güvenlik veri formu mevcuttur.
Tüm atık malzemelerin atılması yerel yönetmeliklere göre olmalıdır.
İdrar, plazmanın glomerüler kapiler duvardan ultrafiltrasyonu ile oluşur.
Relatif molekül kütlesi > 40000 olan proteinler hemen hemen tamamen
tutulurken, daha küçük maddeler kolaylıkla glomerüler filtrata girer.
Birçok BOS proteini plazmadan kan-BOS bariyeri içinden diffüzyonu ile
meydana gelir. Yükselmiş seviyeler, kan-BOS bariyerinde geçirgenliğin
artmasının veya immünoglobülinlerin lokal sentezinin artmasının bir
sonucu olarak dolayı meydana gelebilir.
Reaktif kullanımı
Kullanıma hazırdır.
Trikloroasetik asit (TCA) veya sülfosalisilik asit (SSA) kullanılan türbidimetrik
yöntemler numune içindeki proteinleri büyüklüklerine bağlı olarak çöktürür;
sonucunda meydana gelen bulanıklık stabil olmayıp, topaklı olabilir.
Coomassie blue ve pirogallol kırmızı-molibdat gibi boya-bağlama yöntemlerin
reaktifleri proteinler ile amino asit bileşimlerine bağlı olarak reaksiyona girer,
ancak cam veya plastik eşyaları boyayabilir. Türbidimetrik ve kolorimetrik
yöntemlerin tümü, reaksiyon mekanizmalarından dolayı çeşitli proteinlere,
özellikle Bence Jones proteinleri2 gibi protein fragmanları ve α1-mikroglobülin
gibi küçük proteinlere karşı farklı duyarlılık gösterir.
Açılıp analizörde soğutulduğunda:
Roche Diagnostics Urinary/CSF Protein testi Iwata ve Nishikaze3 tarafından
açıklanan ve daha sonrada Luxton, Patel, Keir ve Thompson4 tarafından
modifiye edilen yönteme dayanmaktadır. Bu yöntemde, benzetonyum klorür,
SSA veya TCA metodolojilerinde gözlenenden daha stabil ve daha eşit
şekilde dağılmış bir bulanıklık oluşturacak bazik bir ortam içinde proteinle
reaksiyona girer. Bu test çalışması, albümine kıyasla γ-globülinde yaklaşık
% 30 bir alt telafi5 ve EDTA’nın ilave edilmesinden dolayı magnezyum
iyonlarından herhangi bir interferansın olmadığını göstermektedir.
Test prensibi
Türbidimetrik yöntem.
Numune, proteini denatüre eden ve magnezyum iyonlarının neden olduğu
interferansı ortadan kaldıran EDTA içeren bir alkalin solüsyon içinde önceden
inkübe edilir. Daha sonra benzetonyum klorür eklenir ve bu bulanıklık oluşturur.
Reaktifler - çalışma solüsyonları
Saklama ve stabilite
TPUC3
15-25 ℃’de raf ömrü:
Diluent NaCl 9 %
2-8 ℃’de raf ömrü:
Açılıp analizörde soğutulduğunda:
Stabilite:7
İdrar:
BOS:
R1 pozisyon B’de ve R2 ise pozisyon C’dedir.
2012-11, V 10 Türkçe
cobas c paket etiketi üzerindeki
son kullanma tarihine bakın.
6 hafta
cobas c paket etiketi üzerindeki
son kullanma tarihine bakın.
12 hafta
Örnek toplama ve hazırlama
Örnek toplama ve hazırlama esnasında sadece uygun tüpler
ve toplama kapları kullanın.
Sadece aşağıda listelenen örnekler test edilmiştir ve kabul
edilebilir olarak bulunmuştur.
İdrar
Rasgele veya 24-saatlik idrar örneklerini kullanın. Koruyucu madde
kullanmayın. Toplama sırasında örnekleri buzdolabında saklayın.
BOS
Özel katkı maddesi gerekli değildir. BOS örneği içinde kan olması
protein değerini geçersiz kılar.1
İdrar/BOS proteini için numuneler floresein verilmeden veya verildikten
en az 24 saat sonra alınmalıdır.6
Not: Protein konsantrasyonu 7000 mg/L’nin üzerinde olan idrar, BOS ve
kontrol numuneleri, bu seviyede protein konsantrasyonu cihaz hatlarını
tıkayabileceği için TPUC3 ile ölçülmemelidir.
R1 Sodyum hidroksit: 677 mmol/L; EDTA-Na: 74 mmol/L
R2 Benzetonyum klorür: 32 mmol/L
Roche/Hitachi cobas c sistemleri
cobas c 311 cobas c 501/502
•
•
1/3
15-25 ℃’de 1 gün
2-8 ℃’de 7 gün
(-15)-(-25) °C’de 1 ay
15-25 ℃’de 1 gün
2-8 ℃’de 6 gün
(-15)-(-25) °C’de > 1 yıl
cobas c sistemleri
TPUC3
Total Protein Urine/CSF Gen.3
Testi yapmadan önce çökelti içeren numuneleri santrifüjleyin.
Santrifüjlenmemiş numuneler yükselmiş sonuçlara neden olabilir.
İzlenebilirlik:8 Bu yöntem NIST’e göre izlenebilir bir primer
standarda karşı standardize edilmiştir.
Kit içinde bulunan malzemeler
Reaktif için “Reaktifler - çalışma solüsyonları” bölümüne bakın.
Kalite kontrol
Kalite kontrol için, “Sipariş bilgisi” bölümünde listelenen kontrol
malzemelerini kullanın.
Ek olarak uygun başka kontroller kullanılabilir.
Kontrol aralıkları ve sınırları her laboratuvarın kendi gereksinimlerine
göre adapte edilmelidir. Elde edilen değerler tanımlanan bu sınırlar
içerisinde olmalıdır. Her laboratuvar, değerler tanımlı sınırlar dışında
olduğu takdirde, alınacak düzeltici önlemleri belirlemelidir.
Kalite kontrolde uygun idari düzenlemelere ve yerel tüzüklere uyun.
Gerekli malzemeler (kit içinde bulunmayan)
“Sipariş bilgisi” bölümüne bakın.
Genel laboratuvar cihazları
Test Çalışması
Test performansının en iyi durumda olması için, bu belge içerisinde
ilgili analizör için verilen talimatları takip edin. Analizöre özgü test
talimatları için uygun kullanıcı kılavuzuna bakın.
Roche tarafından onaylanmamış uygulamaların performansı konusunda
garanti verilmemiş olup, bunlar kullanıcı tarafından tanımlanmalıdır.
İdrar ve BOS aplikasyonu
cobas c 311 test tanımı
Assay type
Reaction time / Assay points
Wavelength (sub/main)
Reaction direction
Units
100 µL
40 µL
Sample volumes
Sample
Diluent (H2O)
–
–
Sample
–
–
–
Normal
Decreased
Increased
6 µL
2 µL
12 µL
cobas c 501 test tanımı
Assay type
Reaction time / Assay points
Wavelength (sub/main)
Reaction direction
Units
2–Point End
10 / 10-30
700/505 nm
Increase
mg/L (mg/dL, g/L)
Reagent pipetting
R1
R2
100 µL
40 µL
Sample volumes
Sample
Normal
Decreased
Increased
24-saatlik idrar protein atımını hesaplamak için:
mg/L x toplam hacim (24 saatte litre) = mg/gün.
2 Point End
10 / 6-14
700/505 nm
Increase
mg/L (mg/dL, g/L)
Reagent pipetting
R1
R2
6 µL
2 µL
12 µL
Sample dilution
Diluent (NaCl)
–
–
–
Diluent (H2O)
–
–
Sample
–
–
–
Sample dilution
Diluent (NaCl)
–
–
–
Kalibrasyon
Kalibratörler
Kalibrasyon modu
Kalibrasyon sıklığı
cobas c sistemleri
Hesaplama
Roche/Hitachi cobas c sistemleri her numunenin analit konsantrasyonunu
otomatik olarak hesaplar.
Çevirme faktörleri: mg/L x 0.1 = mg/dL
mg/L x 0.001 = g/L
S1: H2O
S2-S6: C.f.a.s. PUC
6-noktalı kalibrasyon eğrisinde standart
konsantrasyonları belirlemek için, lota özgü
C.f.a.s. PUC kalibratör değerlerini aşağıda
verilen faktörlerle çarpın.
S5: 0.250
S2: 0.025
S6: 1.0
S3: 0.050
S4: 0.125
RCM
Tam kalibrasyon
- reaktif lotu değiştikten sonra
- kalite kontrol prosedürlerinden sonra
gerektikçe
Sınırlamalar - interferans
Kriter: Yaklaşık 120 mg/L (12 mg/dL; 0.12 g/L) total protein konsantrasyonunda
başlangıç değerinin ± % 10’u içerisinde telafi edilir.
Total protein konsantrasyonu ölçüm aralığının üzerinde 7000 mg/L’ye
kadar yüksek olan numune sonuçlarında cihaz tarafından > ABS
ile uyarı işareti verilecektir.
Bu numuneleri rerun (tekrar çalışma) fonksiyonu aracılığıyla tayin edin.
İdrar
Konjuge bilirubin konsantrasyonu 342 µmol/L (20 mg/dL) olana
kadar belirgin etkileşim yok.
Hemoliz: Hemoglobin interferansa neden olur.9
İlaçlar: Ortak ilaç panelleri kullanılarak terapötik konsantrasyonlarda
hiçbir interferansın olmadığı bulunmuştur.10
İstisna: Levodopa, metildopa ve Na2-sefoksitin yapay olarak yüksek
total protein sonuçlarına neden olur ve kalsiyum dobesilat yapay
olarak düşük protein sonuçlarına neden olur.
Organik olarak bağlı iyot içeren radyopak madde (ör. Hexabrix)
yanlış yüksek sonuçlara neden olabilir.
Jelatin-bazlı plazma replasmanlarının verilmesi idrarda protein
değerlerinin yükselmesine yol açabilir.
Ölçüm aralığının çok dışındaki aşırı derecede yüksek numuneler
yanlış-düşük sonuçlar verebilir.
İdrar numunelerinde yüksek homogentisik asit konsantrasyonları
yanlış sonuçlara yol açar.
Tanı amacıyla, sonuçlar her zaman hastanın tıbbi öyküsü, klinik muayenesi
ve diğer bulgularla birlikte değerlendirilmelidir.
BOS
Hemoliz: Hemoglobin interferansa neden olur.9
GEREKLİ İŞLEM
Özel Yıkama Programlama: Roche/Hitachi cobas c sistemlerinde
bazı test kombinasyonları çalışıldığında, özel yıkama adımlarının
kullanılması zorunludur. Bulaşmadan kaçınma listesinin son versiyonu
NaOHD/SMS/Multiclean/SCCS veya NaOHD/SMS/SmpCln1 + 2/SCCS
Yöntem Sayfalarında bulunabilir. Daha fazla talimat için kullanıcı
kılavuzuna bakın.
cobas c 502 analizörü: Bulaşmanın önlenmesine yönelik gerekli
tüm özel yıkama programları cobas link aracılığıyla alınabilir,
manuel giriş gerekli değildir.
Gerekli olduğunda, özel yıkama/bulaşmadan kaçınma programı bu testle
birlikte sonuçlar raporlanmadan önce gerçekleştirilmelidir.
Sınırlar ve aralıklar
Ölçüm aralığı
40-2000 mg/L (4-200 mg/dL; 0.04-2 g/L)
Konsantrasyonu daha yüksek olan numuneleri rerun (tekrar çalışma)
fonksiyonu aracılığıyla tayin edin. Tekrar çalışma fonksiyonu ile numunelerin
dilüsyonu 1:3 oranında bir dilüsyondur. Tekrar çalışma fonksiyonu kullanılarak
seyreltilmiş numunelerin sonuçları otomatik olarak 3 faktörü ile çarpılır.
2/3
2012-11, V 10 Türkçe
03333825190V10
TPUC3
Total Protein Urine/CSF Gen.3
Alt ölçüm sınırları
Testin alt ölçüm sınırı
40 mg/L (4 mg/dL; 0.04 g/L)
Alt ölçüm sınırı, sıfırdan farklı olabilen en düşük ölçülebilir analit seviyesini
temsil eder. En düşük standardın üstünde bulunan üç standart sapmadaki
değer olarak hesaplanır (standart 1 + 3 SD, tekrarlanabilirlik, n = 21).
Beklenen değerler
24 sa:
İdrar:11
rasgele:
BOS:
< 140 mg/24 sa*
< 150 mg/L*
Yöntem karşılaştırması
Roche/Hitachi cobas c 501 analizöründe (y) insan idrarı ve BOS numuneleri
için elde edilen total protein değerleri Roche/Hitachi 917 analizöründe (x)
aynı reaktif ile elde edilen sonuçlarla karşılaştırılmıştır.
İdrar
Numune büyüklüğü (n) = 70
Lineer regresyon
Passing/Bablok14
y = 0.985x + 6.23 mg/L
y = 0.988x + 5.35 mg/L
τ = 0.970
r = 1.000
* Santrifüjlenen numunelerden elde edilen değerler
Numune konsantrasyonları 47.0 ile 1887 mg/L (4.70-189 mg/dL) arasındadır.
Tietz’e göre referans aralık: 150-450 mg/L (15-45 mg/dL)12
Thomas’a göre referans aralık: 200-400 mg/L (20-40 mg/dL)13
BOS
Numune büyüklüğü (n) = 86
Her laboratuvar beklenen değerlerin kendi hasta popülasyonuna taşınabilirliğini
incelemeli ve gerekiyorsa kendine ait referans aralıkları belirlemelidir.
Spesifik performans verileri
Analizörlerden alınan örnek performans verileri aşağıda verilmektedir. Ayrı
ayrı laboratuvarlardan elde edilen sonuçlar farklılık gösterebilir.
Tekrarlanabilirlik
Kesinlik, tekrarlanabilirlik (n = 21) ve ara kesinlik ile birlikte insan numuneleri
ve kontrollerinin dahili bir protokolde kullanılmasıyla belirlenmiştir (çalışmada
3 kısım, günde 1 çalışma, 21 gün). Aşağıdaki sonuçlar elde edilmiştir:
İdrar
Tekrarlanabilirlik
Precinorm PUC
Precipath PUC
İnsan idrarı 1
İnsan idrarı 2
Ara kesinlik
Precinorm PUC
Precipath PUC
İnsan idrarı 3
İnsan idrarı 4
BOS
Tekrarlanabilirlik
Kontrol Seviye 1
Kontrol Seviye 2
İnsan BOS 1
İnsan BOS 2
Ara kesinlik
Kontrol Seviye 1
Kontrol Seviye 2
İnsan BOS 3
İnsan BOS 4
Ortalama
mg/L (mg/dL)
159 (15.9)
1576 (158)
101 (10.1)
191 (19.1)
SD
mg/L (mg/dL)
1 (0.1)
8 (0.8)
1 (0.1)
4 (0.4)
CV
%
0.7
0.5
1.0
2.2
Ortalama
mg/L (mg/dL)
156 (15.6)
1482 (148)
106 (10.6)
154 (15.4)
SD
mg/L (mg/dL)
2 (0.2)
8 (0.8)
2 (0.2)
1 (0.1)
CV
%
1.5
0.5
1.6
0.9
Ortalama
mg/L (mg/dL)
281 (28.1)
691 (69.1)
355 (35.5)
517 (51.7)
SD
mg/L (mg/dL)
4 (0.4)
4 (0.4)
4 (0.4)
5 (0.5)
CV
%
1.5
0.6
1.1
1.0
Ortalama
mg/L (mg/dL)
272 (27.2)
660 (66.0)
349 (34.9)
501 (50.1)
SD
mg/L (mg/dL)
4 (0.4)
6 (0.6)
4 (0.4)
7 (0.7)
CV
%
1.6
0.9
1.2
1.5
Passing/Bablok14
y = 1.015x - 7.51 mg/L
τ = 0.975
Lineer regresyon
y = 1.010x - 5.23 mg/L
r = 0.999
Numune konsantrasyonları 53.0 ile 1087 mg/L (5.30-109 mg/dL) arasındadır.
Kaynaklar
1. Tietz NW. Fundamentals of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia, Pa:
WB Saunders Co; 1987:336.
2. Boege F. Bence Jones-Proteine. J Lab Med 1999;23:477-482.
3. Iwata I, Nishikaze O. Clin Chem 1979;25/7:1317-1319.
4. Luxton R, Patel P, Keir G, et al. Clin Chem 1989; 35/8:1731-1734.
5. Hohnadel DC, Koller A. Urine protein total. In: Pesce AJ, Kaplan LA,
editors. Methods in clinical chemistry, St. Louis, 1987, Mosby.
6. Koumantakis G. Fluorescein Interference with Urinary Creatinine and
Protein Measurements. Clin Chem 1991;37/10:1799.
7. Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO
Publication WHO/DIL/Lab/99.1 Rev.2. Jan. 2002.
8. Standard Reference Materials from NERL, traceable to NIST
(National Institute of Standards and Technology).
9. Yilmaz FM, Yücel D. Effect of Addition of Hemolysate on Urine and
Cerebrospinal Fluid Assays for Protein. Clin Chem 2006;52:152-153.
10. Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry:
recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug
interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385.
11. Junge W, Wilke B, Halabi A, et al. Reference Intervals for Total
Protein in Collected and Random Urine using the Benzethonium
Chloride Method. Clin Chem 2006;52:A157[Abstract].
12. Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests. 3rd ed.
Philadelphia: WB Saunders 1995:518-523.
13. Thomas L. Labor und Diagnose. 6. Auflage; TH-Books Verlagsgesellschaft
mbH, Frankfurt/Main, 2005:930-934.
14. Passing H, Bablok W, Bender R, et al. A General Regression Procedure
for Method Transformation. J Clin Chem Clin Biochem 1988;26:783-790.
Bu Yöntem Sayfasında, ondalık sayının tam sayı ile kesirli kısmı
arasındaki sınırı belirleyen ondalık işaret olarak nokta kullanılmaktadır.
Binlik işaret ise kullanılmamaktadır.
Önemli eklemeler veya değişiklikler sayfa kenarındaki değişiklik çizgileri ile belirtilmektedir.
© 2012, Roche Diagnostics
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim
www.roche.com
2012-11, V 10 Türkçe
3/3
cobas c sistemleri