Bildiri PDF
Transkript
Bildiri PDF
28. Ulusal Tarımsal Mekanizasyon Kongresi 4-6 Eylül KONYA 2013 Aflatoksinli İncirlerin UV Işık Altında Tespiti ve Eşikleme Metodu Kullanılarak Sayısallaştırılması Ömer Barış ÖZLÜOYMAK Çukurova Üniversitesi Ziraat Fakültesi Tarım Makinaları Bölümü, Adana [email protected] ÖZET Aspergillusflavus ve Aspergillusparasiticus mantarlarının toksikmetaboliti olan aflatoksin, gıdalar üzerinde doğal olarak oluşan zararlı bir kalıntıdır. Aflatoksin; tahıllar, yağlık tohumlar, aromatik bitkiler, fındık, kurutulmuş meyve, et, süt gibi geniş aralıkta değişen tarımsal ürünler üzerinde etkilidir. Aflatoksin, tarımsal ürünlerle ilgili olarak, dünya üzerindeki yaygınlığı, ürünler üzerindeki önemli etkileri ve sağlık sorunlarıyla doğrudan ilişkisi nedeniyle 40 yıldan fazla bir süredir üzerinde çalışmalar yürütülen önemli bir sorundur. Dünya Sağlık Örgütünün (WHO), aflatoksinli tarımsal ürünlerin dünya ölçeğinde tespiti ve insan beslenme zincirine olan etkilerini konu alan ve halk sağlık stratejileri üretilmesi amacıyla yürüttüğü önemli çalışmalar bulunmaktadır. (Anonim, 2005a). Bu çalışmada; gelecekte bu sorunun çözülmesinin bir parçası olacağı düşünülen aflatoksinin, belirlenmesi ve bilgisayara tanıtılması amaçlanmıştır. Bu nedenle, dış satımda önemli bir paya sahip olan ve iç tüketimde önemli bir yer tutan kuru incir, örnek olarak seçilmiştir. Çalışmada; görüntü işleme algoritmaları ile flüoresan sınıflandırma gerçekleştirilmiş, “parlak yeşilimtrak sarı” flüoresan uyartım özellikli aflatoksin bulaşık incirler belirlenmiştir. Bulaşık incirlerin “parlak yeşilimtrak sarı” rengini tanımlamak için, içinde 365 nm dalga boyundaki UV lambaları olan ve kamera üzerinden görüntülerin alındığı bir karanlık oda oluşturulmuştur. Görüntü alma işleminin ardından; aflatoksinle bulaşık incirlerin resimleri analiz edilmiş, sayısal görüntü işleme teknikleri kullanılarak 365 nm dalga boyundaki UV ışık altında aflatoksinli bölgeler tespit edilmiştir. Anahtar kelimeler: Görüntü İşleme, Aflatoksin, Kuru İncir, UV. Determination of Aflatoxin Contaminated Figs under the UV Lightening and Digitizing by using the Thresholding Method ABSTRACT Aflatoxins, toxic metabolites of Aspergillusflavus and Aspergillusparasiticus fungi, are naturally occurring contaminants of food. Aflatoxins can affect a wide range of commodities including cereals, oilseeds, spices and tree nuts as well as milk, meat and dried fruit. Wellknown within the agricultural community, aflatoxins have been studied for over forty years due to their widespread occurrence and their significant impact on crops. The World Health Organization (WHO) hosted a workshop to create an integrated plan intended to generate culturally appropriate, long term, public health strategies to reduce aflatoxin exposure in developing countries. In this study was to aimed an applicable method for aflatoxin problems in the future and itsdeterminated with recognition from by computer. Therefore; dried fig, which has an important share in export and domestic consumption, was taken as an example. In this research; fluorescent sorting with the image processing algorithms has been examined and aflatoxin contaminated figs with the property of “bright greenish yellow” fluorescent excitation were determined. To recognize the “bright greenish yellow” color of contaminated figs, a dark room was designed which had 365 nm wavelength UV lamps and got 51 28. Ulusal Tarımsal Mekanizasyon Kongresi 4-6 Eylül KONYA 2013 sample images through a camera. After the capturing process, pictures of aflatoxin contaminated figs has been analyzed and detected areas with aflatoxin under the UV light of 365 nm wavelength using digital image processing techniques. Key words: Image Processing, Aflatoxin, Dried Fig, UV. GİRİŞ 1960 yılında İngiltere’ye hayvan yemi olarak ithal edilen Brezilya yerfıstığının, 100 bin hindi ile 20 bin keklik, sülün ve ördeğin ölümüne neden olduğu, dünyada ilk defa meydana gelen bu olaya (Hindi-X) adı verildiği ve sonrasında aflatoksinin ilk defa tanımlandığı kaynaklarca belirtilmektedir (Anonim, 2005b). İlk olarak, 1960 yılında tanımlanan aflatoksin, bitkisel kökenli ürünlerde, özellikle tahıllar, yağlı tohumlar, kuru ve sert kabuklu meyveler ile baharatlarda insan hayatını da tehdit eden önemli bir hastalık etmeni olarak karşımıza çıkmaktadır (Anonim, 2007a). Karaciğer kanseri başta olmak üzere ciddi sağlık sorunlarına neden olan aflatoksin konusunda üreticiler ve tüketicilerin bilgilendirilmesi yaşamsal önem taşımaktadır (Anonim, 2005b). Konu; benzer açıdan ülkemiz için değerlendirildiğinde, aflatoksinle ilişkili olarak ilk sorunun, 1967 yılında Kanada’ya ihraç edilen iç fıstıkta yaşandığı bildirilmiştir (Anonim, 2007a). Aflatoksin birçok üründe meydana gelebiliyor olmasına karşılık; Yer fıstığı, Antep fıstığı gibi kabuklu kuru meyveler, mısır gibi hububat, pamuk tohumu- ayçiçeği tohumu gibi yağlı tohumlar, incir, üzüm gibi kurutulan meyveler, hayvan yemleri, ay çekirdeği, et, süt ve yumurta, kırmızıbiber ve diğer baharatların aflatoksin oluşumuna daha hassas oldukları bilinmektedir (Anonim, 2007a). Gıda yoluyla insanlara geçen aflatoksinin en çok karaciğer kanserine neden olduğu, aflatoksinin karaciğer kanserine neden olmasının yanında Hepatit (B) ve (C) virüslerinin vücuttaki etkisini arttırdığına, bağışıklık sistemini bozduğuna da dikkat çekilmektedir (Anonim, 2005b). Ülkemizde gıda maddelerinde bulunmasına izin verilen aflatoksin miktarı 5 mikrogram iken Avrupa ülkelerinde bu miktar 2 mikrogramdır (Çam, 2007). Ülkemizde gıda maddelerinde bulunmasına izin verilen 5 ppb düzeyi, milyarda 5'in ifadesidir, yani 1 kg'da 5 mikrogram, 1 tonda 5 miligram, 1000 tonda 5 gram anlamına gelmektedir. Avrupa ülkelerinde ise bu sınır 2 ppb'dir. 1 kg gıda maddesinde 1 ppb aflatoksin, 0,000001 gram aflatoksin demektir (Coşkun, 2007). Aflatoksinler; doğada yaygın olarak bulunan Aspergillusflavus, Aspergillusparasiticus küfleri tarafından üretilen mikotoksinlerdir. Günümüzde 18 değişik aflatoksin tipi tanımlanmış olup; B1, B2, G1, G2, M1 ve M2 en yaygın olanlardır. Aflatoksinler arasında ise aflatoksin B1 en yüksek toksik etkiye sahiptir. Küfler; hava ve toprakta doğal olarak bulunan, tarımsal ürünlerde de sık sık rastlanan mikroorganizmalardır (Anonim, 2007a). Tarımsal ürünlerin yaklaşık %25’i mikotoksinlerle kontamine durumdadır. Mikotoksin içeren gıdaların üretimden kaldırılması veya ihraç ediliyorsa satıcı ülkeye iadesi ekonomik açıdan büyük kayıplara neden olmaktadır. 1994 yılında Almanya’ya ihraç edilen kırmızı pul biber, limitlerin üzerinde aflatoksin içerdiği için iade edilmiştir. 1994 yılındaki 2522 tonluk kırmızıbiber ihracatının, 1996 yılında 527 tona düşmesine neden olmuştur. Bu düşüşün ekonomik karşılığı ise 2.126.000 $’dır. Dünya genelinde, ihracatı yapılan gıda maddelerinin mikotoksin nedeniyle etkilenen kısmının ekonomik bedelinin 2002 verilerine göre 100 milyar dolar civarında olduğu bildirilmektedir (Anonim, 2007b). Gıdalarda aflatoksin; üretim, işleme, taşıma ve depolama aşamalarında ortaya çıkmaktadır. Gıdalarda küf gelişmesi ve aflatoksin oluşumunda rol oynayan en önemli faktörler gıdayı çevreleyen havanın bağıl nemi ile depolama sıcaklığıdır. Bilimsel araştırmalardan edinilen bilgilere göre, küf gelişimi ve mikotoksin oluşumu için optimum sıcaklık 25–30°C, bağıl nem ise % 88–95’dir (Anonim, 2007a). 52 28. Ulusal Tarımsal Mekanizasyon Kongresi 4-6 Eylül KONYA 2013 yapıya “Syconium” 2006). Bu çalışmanın temel amacı, ülkemizin kuru meyve ihracatında büyük bir paya sahip olan kuru incirler üzerindeki aflatoksinli bölgeleri, karanlık bir ortamda UV ışık altında bilgisayar kontrollü tespit ederek, bilgisayar ortamında sayısal hale dönüştürmektir. denmektedir (Anonim, Yapılan çalışmada araştırmanın ana materyalini kuru incir ihracatçısı firmalardan temin edilen aflatoksinli incirler oluşturmaktadır. Bununla birlikte çalışmanın kapsamı gereğince, yazılımsal ve donanımsal olmak üzere pek çok ekipmana ihtiyaç duyulmaktadır. Çalışmada ayrıca, kuru incirleri dik açıdan gören kamera ile 365 nm dalga boyuna sahip UV lambalar kullanılmıştır. Kullanılan kamera; AVTGuppyF-033C marka olup, renkli çekim yapabilmektedir. Kameralar bilgisayara, Firewire olarak da bilinen IEEE 1394 standardında kablolarla bağlanmıştır. Çalışmanın en önemli parçası ise yazılımdır. Görüntülerin en optimum düzeyde alınarak işlenebilmesi için gelişmiş bir bilgisayarla birlikte; National Instruments firmasına ait “LabVIEW Professional Development System”,“Vision Development Module” ve “Vision Acquisition Software” yazılımları kullanılarak görüntüler alınmış ve değerlendirilmiştir. Oluşturulan sisteme ilişkin resimler Şekil 1’de yer almaktadır. MATERYAL veYÖNTEM Materyal Gerçekleştirilen çalışma için karanlık bir ortam gerekli olduğu için Çukurova Üniversitesi, Ziraat Fakültesi, Tarım Makinaları Bölümü laboratuvarlarından bir tanesi karartılarak kullanıma hazır hale getirilmiştir (Karanlık oda oluşturulmuştur.) İncir’in dünyadaki en büyük üreticisi Türkiye’dir. Başlıca dış satım ürünümüz olup, Ege bölgesinde ön planda yer almaktadır. En fazla Aydın ve İzmir yöresinde yetiştirilmektedir. Meyve; şişkin, etli çukur, iç yüzeyi tamamen çiçeklerle kaplı bir kılıf şeklindedir. İncir meyvesi aslında incir çiçek kılıfının (receptacle) büyümesi ve etlenmesi suretiyle meydana gelmiş yalancı bir meyvedir. Tüm Ficus türlerinde görülen bu Şekil 1. Çalışma için oluşturulmuş deneme test düzeneği Yöntem altında aflatoksinin görünürlüğüne resimler Şekil 2’de verilmiştir. Çalışmada, UV lambaların aflatoksinli incirler üzerindeki etkileri ve renk farklılıklarının incelenmesine yönelik inceleme ve denemeler yapılmıştır. Teknik olarak aflatoksini gün ışığında çıplak gözle görmek olanaksızdır. Bilindiği gibi insanın görme sınırı 380-760 nm dalga boyları arasındadır. Aflatoksin ise 365 nm dalga boyunda görülebilmektedir. Buna ilişkin yapılan bir ön çalışma neticesinde; gün ışığı ve UV ışık ilişkin Aflatoksin, 365 nm UV dalga boyunda fosforesan özellik göstererek ışıma yapmaktadır. Şekil 2’den de görüleceği üzere (a) ve (b) fotoğrafları gün ışığında elde edilmiş olup, incirler arasında herhangi bir farklılık görülmemekte, aynı ürünlere ait (c) ve (d) fotoğrafları karanlık ortamda UV ışık altında elde edildiğinde incirler üzerindeki aflatoksinli bölgeler görünür hale gelmektedir. Diğer bir ifadeyle UV ışık altında sağlıklı ürün 53 28. Ulusal Tarımsal Mekanizasyon Kongresi 4-6 Eylül KONYA 2013 herhangi bir ışıma yapmazken, aflatoksinli ürünler parlak yeşil bir ışıma yapmaktadır Şekil 2. Kuru incirdeki aflatoksin oluşumu Karartılmış ve üzerinde özel UV lambalar bulunan bir ortamda; UV ışık altında belirlenebilen aflatoksin, renk farklılıklarına duyarlı kamera kullanılarak tespit edilmiş, algılanan renk farklılıklarından hareketle de aflatoksinli ürün, bilgisayarda özel yazılımlar kullanılarak diğer sağlıklı ürünlerden ayırt edilebilmiştir. DIP (Digital Image Processing) – Sayısal Görüntü İşleme tekniklerinin uygulanmasıyla ve gerekli yazılımın yapılmasıyla bilgisayarın, aflatoksinli ürünü gördüğünde, aflatoksinli bölgeyi sayısal olarak işaretlemesi yani hastalıklı bölgeyi tespit etmesi sağlanmıştır. Eşikleme; partikül bölgesi ve zemin bölgesi olmak üzere bir görüntüyü 2 bölgeye bölümlendirme işleminden oluşmaktadır. Daha basit olarak ifade edilecek olursa; belirli bir eşik değerinin üzerinde kalan tüm pikseller beyaz (veya farklı bir renk), diğerleri ise siyah olarak ayarlanmaktadır (National Instruments Tutorial, 2006). Kameradan bilgisayara gönderilen görüntülerin aktarımını sağlayarak, sistemin hastalıklı ürünleri algılayabilmesi ve seçebilmesi için özel bir yazılım gerçekleştirilmiştir. Bu yazılım ile birlikte geliştirilen yazılımda özel filtreler de kullanılarak sonuca varılmıştır. Belirli bir eşik değerinin üzerindeki pikseller “nesne (ön plan)” olarak adlandırılırken, diğerleri “zemin (arka planartalan)” olarak anılmaktadır(Anonim, 2009). Matematiksel olarak ifade edilecek olursa; RGB (Red, Green, Blue) formatında elde edilen görüntülere, renk eşiği metodu uygulanarak ve elde edilen yeni görüntü ile asıl görüntü değerleri birbirleri ile örtüştürülerek yeni bir görüntünün elde edilmesi sağlanmıştır. g (i, j ) 1 f (i, j ) T (1) g (i, j ) 0 f (i, j ) T (2) Burada; Çalışmada; görüntü işleme tekniklerinden en çok bilinen “görüntü eşikleme” (image thresholding) metodu kullanılmıştır. T = Seçilen eşik değeri, f(i,j) = Görüntünün i. sütun, j. satırdaki piksel değeri, 54 28. Ulusal Tarımsal Mekanizasyon Kongresi 4-6 Eylül KONYA 2013 g(i,j) = Eşikleme işlemi gerçekleştirilmiş görüntü elde edilir (Anonim, 2008). ile asıl görüntü değerleri birbirleri ile örtüştürülerek yeni bir görüntünün elde edilmesi sağlanmıştır. Uygulanan bu işleme görüntü işleme programcılığında “maskeleme” adı verilmektedir. Bu sayede asıl görüntü ile işlenen görüntü üst üste getirilerek maskeleme işlemi tamamlanmış olmaktadır. Sistemde kullanılan renk parametreleri; kırmızı renk için 0-255, yeşil renk için 0-155 ve mavi renk için ise 0-180 aralığındadır. Yapılan maskeleme işlemine dair bir örnek çalışma Şekil 3’de gösterilmektedir. Sonuç görüntü artık “ikilik görüntü (binary image)” olarak adlandırılacaktır. Renkli görüntüler içinse, her bir renk komponenti için ayrı ayrı eşikleme işlemi yapılması gerekmektedir. Sistemde kullanılan görüntü işleme programında RGB (Red, Green, Blue) formatında elde edilen görüntülere, renk eşiği metodu uygulanmış, elde edilen yeni görüntü Şekil 3. Orjinal görüntü ile eşikleme (thresholding) ve maskeleme işlemi yapılmış görüntü ARAŞTIRMA BULGULARI yardımıyla belirlenmiştir. Şekil 4’de incirler üzerindeki aflatoksin etkisiyle oluşan renk farklılığı gösterilmiştir. Kamera tarafından bilgisayara görüntü aktarımı sırasında Kuru incirler, karanlık ortamda UV ışık kaynağıyla aydınlatılmış ve aflatoksinli incirler üzerindeki olağan dışı yansıma, kamera 55 28. Ulusal Tarımsal Mekanizasyon Kongresi 4-6 Eylül KONYA 2013 sınırlarından çoğu çevirmektedirler. hastalıklı ürünlerin algılanabilmesi için özel bir yazılım hazırlanmıştır. Bu yazılım ile birlikte yazılımda özel filtreler de kullanılarak sonuca ulaşılmıştır. Bu sonuçlara göre; UV ışık altında aflatoksinli ürünler kamera ile fotoğraflanmış, elde edilen görüntüler bilgisayara aktarılarak görüntü işleme teknikleri yardımıyla aflatoksin tespit edilerek, belirlenmiştir. Şekil 4.a’da kuru incirlerin orijinal fotoğrafları, Şekil 4.b’de bulunanlar ise aynı fotoğraflara bilgisayar ortamında görüntü işleme teknikleri kullanılarak müdahale edilmiş halleridir. zaman geri Geri gönderilen ürünler imha edilirken, kaybedilen ülke prestiji ve döviz ise ekonomimizde büyük kayıplara neden olmaktadır. Özet olarak, ülkemizin ihracatında söz sahibi olduğu Antep fıstığı, kuru incir ve kırmızıbiber gibi ürünlerin de aflatoksin açısından duyarlı ürünler olduğu düşünülürse, son yıllarda ihracatımızın daralmasına neden olan olumsuzlukların yaşanmaması için özellikle paketlemeden önceki aşamada uygulanmak üzere yeni yaklaşım ve yöntemlerin uygulayıcılara aktarılması önemli görülmektedir. TARTIŞMA ve SONUÇ Son yıllarda Türkiye’nin dışsatım atılımı yadsınamaz düzeydedir. En önemli dışsatım ürünlerimizden birisi olan kurutulmuş gıda dışsatımı ise ülkemizin dışsatım lokomotifi düzeyinde hak ettiği yerini almaktadır. Bu gıdaları kuru incir, kayısı, dut, erik, v.s. şeklinde sıralamak olasıdır. Aflatoksinli ürünlerin dışsatım olanağı olmadığı gibi, zaten AB’ye bağlı ülkeler de söz konusu ürünleri Gerçekleştirilen bu çalışma; benzer konularda çalışma yapmayı amaçlayan araştırıcılar için de bir örnek teşkil edecek, daha farklı alanlarda sistem tasarımı açısından yararlanma olanakları konusuna eğilmelerini olumlu etkileyecektir. 56 28. Ulusal Tarımsal Mekanizasyon Kongresi 4-6 Eylül KONYA 2013 A b Şekil 4. Bilgisayarda özel görüntü işleme teknikleri kullanılarak elde edilmiş aflatoksinli kuru incir görüntüleri LİTERATÜR LİSTESİ Anonim, Processing). Anonim, 2005a. PublicHealthStrategiesforPreventing Aflatoxin Exposure. http://gidakurutma.sitemynet.com/kurut ma/id4.htm,Erişim: Ağustos 2007. ÇAM, Tansel S., 2007. Yanı başımızdaki ölüm: Aflatoksin. http://blog.milliyet.com.tr/Blog.aspx?BlogNo= 46299,Erişim: Temmuz 2007. http://www.ntvmsnbc.com/news/342446. Erişim: Eylül2007. National Instruments Tutorial, 2006. Thresholding an Image. http://zone.ni.com/devzone/cda/tut/p/id/2916 #toc0#toc0,Erişim: Eylül 2007. Anonim, 2006. İncirin Botanik Özellikleri ve Ekolojik İstekleri. http://www.erbeyliincir.gov.tr/incir_arasti rma_botanik_ozellikleri_ve_ekolojik_istekleri.a sp, Erişim: Ağustos 2007. Anonim, 2007a. Osmaniye Ticaret Borsası Duyurular Rehberi: Aflatoksin nedir? http://www.osmaniyetb.org.tr/aflatoksin. asp,Erişim: Ağustos 2007. Gıda (Image COŞKUN, A., 2007. Evdeki Kanser. Anonim, 2005b. Güncel ve ciddi sorun: Aflatoksin. Anonim, 2007b. Mikotoksinler. Thresholding http://en.wikipedia.org/wiki/Thresholding _(image_processing),Erişim: Ocak 2010. http://www.who.int/ipcs/events/2005/wo rkshop report.pdf,Erişim: Kasım 2005. asp, 2009. Güvenliğinde http://www.hemakim.com.tr/img/makalel er/GidaGuvenligindeMikotoksinler.pdf,Erişim: Ağustos 2007. Anonim, 2008. Binary Image Processing. http://www.ce.yildiz.edu.tr/mygetfile.php ?id=21369,Erişim: Ocak 2009. 57