Mikrobiyoloji Numune Alma - Kitap Şifahanesi ve Arşiv

TÜRKİYE YAZMA ESERLER KURUMU BAŞKANLIĞI
KİTAP ŞİFAHANESİ VE ARŞİV DAİRESİ BAŞKANLIĞI
Ar-Ge Birimi
Mikrobiyoloji Numune Alma
13.04.2015
YÖNTEM
Mikrobiyolojik Yöntemler
Geleneksel
Boyasız mikroskobik inceleme
Boyasız mikroskobik inceleme
Kültür yöntemi
Hızlı
Mikroskobik inceleme, yüzeysel mantar enfeksiyonlarına tanı koymak için kullanılan basit,
hızlı ve ucuz bir yöntemdir.
UYGULAMA
Eserlerde görülen mantar enfeksiyonlarında boyasız direkt mikroskobi incelemesi yapılabilir.
Mikroskobik incelemede tipik maya-hif yapılarının görülmesi tanı koydurucudur.
Örnek Alırken Gerekli Malzemeler Nelerdir?
1. Lam, lamel
2. % 10-30’luk KOH (potasyum hidroksit) solüsyonu
3. Steril bisturi ucu veya körleştirilmiş saplı bistüri, penset
4. Petri kutusu
5. Kâğıt havlu veya kurutma kâğıdı
6. Eldiven
7. Alev kaynağı (deneyim kazanınca veya laboratuar şartları uygunsa)
8. Işık mikroskobu
Eser, yapılacak işlemden dolayı zarar görmemelidir. İşlem sırasında korunmak amacı ile eldiven
kullanılabilir. Körleştirilmiş saplı bistüri, bir bistüri ucu veya tercihen bir lamın kenarı ile diğer lam
üzerine enfeksiyonlu bölgeden kazınarak toplanır. (bistüri ucu veya saplı bistüri birden fazla eserde
kullanılacaksa her seferinde alevden geçirilmeli veya yeni steril bistüri ucu açılmalıdır.) Tahta dil
baskısı veya lam kullanılarak sürüntü örneği alınabilir. Örnekleme yapılırken lam örnek alınacak
bölgenin altına tutulur, enfekte görünümlü bölgeden ilk kazıma materyali atıldıktan sonra büstirinin
sivri kısmı veya lam köşesi ile özellikle kolay ufalanan toz gibi kazıntı materyali alınır. Enfekte
görünümlü bölgeden ilk kazıntı materyali atılıp biraz daha derinden alınan kazıntı materyali lam
üzerine toplanır. Eserde mikroorganizma şüphesine karşın doğrudan kazıma yöntemi ile negatif sonuç
alınması durumunda alınacak numune parça halinde içerisinde KOH bulunan bir cam tüpte 24 saat
(süre daha kısa süreye çekilebilir) bekletilir. Numunenin tamamen erimesi sağlandıktan sonra santrifüj
edilip çöküntü lama yayılarak incelenir. Bu yöntem ile daha fazla miktarda eserden numune
incelenerek mantar yapılarını görme olasılığı arttırılmış olur. Lam üzerine toplanan materyal bir araya
getirilip damlalıkla %10-%30 KOH damlatılır. Lamel ile üzeri örtülür. Hazırlanan örnek mantar
yapılarını görünür hale getirmesi için kâğıt havlu üzerinde 15-30 dk bekletilir. Örnek lam laboratuar
şartları emniyetli ise alevden geçirilerek (kaynama noktasına gelmeden ) mikroskopta hazır hale
getririlir. Örnek mikroskopta incelenmeden önce bir parça kâğıt havlu ile lamelin üzerine nazikçe
bastırılır. Böylece materyal inceltilerek mantar yapılarının daha iyi görülmesi sağlanır.
Şeffaf Bant Yöntemi
Uygun uzunlukta selofan bant, iki ucundan tutularak koloni üzerine hafifçe bastırılır. Daha sonra bu
bant, üzerine laktofenol anilin mavisi damlatılmış lam üzerine hava kabarcığı oluşturmadan
yapıştırılır.
Kaynaklar
1. Kantarcıoğlu, A.S., “Müzelerdeki Eserlerin Bozulmasında Mikropların Rolü”, T.C Kültür Bakanlığı, Ankara,
(1997).
2. Mantarların Yapısı ve Genel Özellikleri Prof. Dr. Nuri KİRAZ, Erişim:
www.slideserve.com/genera/mantarlarin-yapisi-ve-genelzellikleri
3. Türkiye’de Mantar Epidemiyolojisi: İzolatların Klinik Önemi Aspergillus Enfeksiyonları Dr. Ayşe
KALKANCI, Erişim:
https://www.klimud.org/public/uploads/dosya/1352728064.pdf
4. Maya Hücre Duvar Yapısının Dinamikleri Nazife Yiğit, Mehlika Benli, Erişim: Orlab On-Line Mikrobiyoloji
Dergisi Yıl: 2005
Cilt: 03 Sayı: 03 Sayfa: 11-17 www.mikrobiyoloji.org/pdf/702050303.pdf
5. Mikrobiyoloji Laboratuvar Süreci Dr. Özcan Deveci, Erişim: http://www.dicle.edu.tr/Contents/5c0c616419e0-4913-acd1d008119e65f7.pdf