yağ koruyucu lipid boyama seti

YAĞ KORUYUCU LİPİD BOYAMA SETİ; PROPİLEN GLİKOLLÜ
GBL® CONVASTAIN®
5192
1-Amaç
IVD tıbbi tanı cihazı olarak tasarlanmış ve üretilmiştir. Histoloji boyama kitidir. Taze doku kesitlerinde yağların
ve lipidlerin gösterilmesi amacıyla kullanılır. Özellikle yağ hücreleri ve nötral yağların gösterilmesi yaygın
kullanım alanıdır.
Yağların anormal olarak bulunduğu veya sürüklendiği yerleri tespit etmekte de kullanılır. Bunun yanında
anormal olarak, fazla miktarda yağ hücresi bulunduran bazı tümörleri diğerlerinden ayırmaya yarar.
Oil red O, yağda eriyen bir boyar maddedir. Bu özelliğinden dolayı yağlı kısımların kırmızı görünmesini
sağlar.
2-Kit içeriği, özellikleri ve uyarılar
Genel hususlar
Kit çeşitli komponentlerden oluşmuştur. Komponentlerin adları, içerik ve diğer özellikleri aşağıda
belirtilmektedir.
Test sayısı
Boyama seti, daldırma metodunun uygulanması esas alınarak tasarlanmıştır. Daldırma (immersiyon)
metodunun uygulanmasında 50 ml ayıraç hacimli inkübasyon kaplarına göre açıklamalar yapılmıştır. Bu
kaplar bir çalışmada 8 lam alırlar. Sette bulunan en dayanıksız komponent miktarı, çalışma miktarının
belirlenmesinde kullanılır.
Setlerde çok düşük çalışma sayıları dolayısıyla örtme boyaması uygulanacaksa, kabul ettiğimiz birim hacim
0,5 ml’dir. 50 ml ayıraç en az 100 teste yeter.
Kit komponentleri:
A-Formalin tamponlu nötral fiksatif
B- Propilen glikol
C-Oil red O Boyası
D-Propilen glikol % 85
E- Hematoksilin mayer çözeltisi
F- Sodyum fosfat çözeltisi
G- Örtme ortamı; Gliserollü
3-Ekipmanlar
Boyama metodunda elinizdeki bu kite ilave olarak kullanılan ekipmanlar şunlardır: Laboratuvar masası ve
sandalyesi, mikroskop, sıcak su banyosu (60 C derece), lam kurutucu tabla, çeşitli ölçüde pipetler ve
mezürler, 8 lamlık kapaklı boyama kapları (en az 8 adet), distile su, lamlar (çok temiz), çeşitli boyutta
Revizyon numarası-01
İlk Yayın Tarihi: 19.03.2013
Revizyon Tarihi: 20.03.2013
lameller, objektif daldırma yağı, alkolik yüzey dezenfektanı, alkolik el dezenfektanı, atık kovası, atık kovası
dezenfektanı, cama yazar kalem.
4-Numuneler ve hazırlık
Doku numunelerinin hazırlanması
Dondurulmuş doku numuneleri tercih edilir. Doku numuneleri taze olmalıdır. Doku kesitleri 6-10 mikrometre
civarında olmalıdır.
Vücut sıvılarından elde edilen hücre numunelerinin hazırlanması
Çeşitli vücut sıvılarından alınan numuneler ve diğer vücut numuneleri kullanılabilir. Numuneler
alınmalarından itibaren birkaç saat içinde incelemeye alınmalıdır. Bunlar çok ince olmayan yaymalar
yapılarak incelenirler.
Numunelerin alındığı kişilerde bulaşıcı bir hastalık mevcudiyeti bilinmediğinden, numuneler infekte materyal
olarak kabul edilmeli ve buna uygun tedbirler alınmalıdır.
Daldırma kapları
Daldırma metodu tercih edilmelidir. Daldırma metoduyla boyama yapılacaksa buna uygun hazırlıklar yapılır.
Daldırma kapları 50 ml, 25 ml, 20 ml, 15 ml veya çok daha büyük ayıraç hacimli olabilir.
Daldırma kaplarının sırası, içeriği ve sıcaklığı aşağıda verilmiştir:
Formalin tamponlu nötral fiksatifi: 15-25 C derece. Daha sık değiştirin.
Propylene Glycol (GBL-8110): 15-25 C derece. Daha sık değiştirin.
Oil red O Boyası: 60-65 C derece. Bu sıcaklığı oluşturmak için, sıcak su banyosunu tercih edin. Belli bir
süre bu sıcaklıkta beklemesine rağmen presipitasyon mevcutsa elyaftan süzün.
Propilen glikol çözeltisi % 85 15-25 C derece. Daha sık değiştirin.
Hematoksilin mayer çözeltisi: 15-25 C derece.
Sodyum fosfat çözeltisi %1: 15-25 C derece. Daha sık değiştirin.
Daldırma metodu
Preparatı havada 30 dakika boyunca kurutun.
Formalin tamponlu nötral fiksatifi kabına daldırın. 10 dakika sonra silkeleyerek çıkarın.
Distile suyla 3 çevrim yıkayın.
Propilen glikol kabına daldırın. 5 dakika sonra silkeleyerek çıkarın.
Oil red O Boyası kabına daldırın. 60-65 C derecede 10 dakika bekletin. Süre bitiminde silkeleyerek çıkarın.
Propilen glikol çözeltisi %85 kabına daldırın. 5 dakika sonra silkeleyerek çıkarın.
Distile suyla kısaca yıkayın.
Hematoksilin mayer çözeltisi kabına daldırın. 1 dakika sonra silkeleyerek çıkarın.
Kısaca distile suyla yıkayın.
Sodyum fosfat çözeltisi %1 kabına daldırın. 1 dakika sonra silkeleyerek çıkarın.
Distile suyla yıkayın.
Örtme ortamı; gliserollü ile örtün.
Mikroskopta inceleyin.
Örtme metodu
Elinizdeki set, daldırma metodu esas alınarak tasarlanmıştır. Buna rağmen iş hacmi çok küçük
laboratuvarlarda örtme metoduyla da kullanılabilir. Örtme boyaması, yukarıda anlatılan daldırma metodunu
taklit edecek şekilde yapılmalıdır. Bazı etapların daldırma metoduyla yapılması özellikle tercih edilmelidir.
Her örtme boyamasında 0,3 ml ile 0,5 ml civarında ayıraç lama eklenebilir.
Revizyon numarası-01
İlk Yayın Tarihi: 19.03.2013
Revizyon Tarihi: 20.03.2013
Örtme boyamasında 0,1-1 ml pipetleriniz varsa mavi renkli pipet uçlarını kullanabilirsiniz. Pipetleriniz yoksa
genel kullanım pipetlerini tercih ediniz.
5-Ölçümler, hesaplama, performans, kontrol ve izlenebilirlik
Yağ
Çekirdek
Kırmızı
Mavi
Boyama süreleri daha kısa tutulabilir. Uygulayıcıları kararsızlığa itmemek için alt limitler verilmemiştir.
Boyama süresi olarak başlangıçta prospektüsü dikkate alınız. Daha sonraki çalışmalarınızda çıkan neticelere
göre her etabın süresini farklı farklı azaltınız veya arttırınız. Her etapta kendi alışkanlıklarınıza göre en uygun
bulduğunuz görsel neticeyi elde ettiğiniz süreyi prospektüse not ederek, buna uygun boyama yapınız.
Boyama neticelerinde ayırt ediciliği arttırmak için şu uygulamalardan biri veya birkaçı tercih edilmelidir: 1)
Boyama süreleri azaltılmalıdır. 2) Suyla yıkama süreleri uzatılmalıdır. 3) Propilen glikolle işlem süreleri
uzatılmalıdır.
Kitin kullanılabilmesi için özel bir eğitim gerekmez. Kullanım kılavuzunda yazan talimatların aynen
uygulanması yeterlidir. Kit ve boyama metodu, klinik veya klinik dışı tanı (özellikle eğitim) amacıyla
kullanılabilir.
6-Tehlikeler ve uyarılar
Kullanım sırasında cilde temas ettirmeyiniz ve gözlerinize sıçratmayınız.
Cihazın sınıf özellikleri
Kişisel test cihazı değildir. Steril etiketli bir cihaz değildir. Performans değerlendirme cihazı değildir. Vücut
dışında kullanılan tıbbi tanı cihazıdır ve “diğerleri” grubunda yer alır.
Kaynaklar
A. Piece. 1972. A manuel for histologic technicians. 3. Baskı. Little Brown and Co. Boston.
J. Crookham. R. Dapson. 1991. Hazardous chemi,cals in the histopathology laboratory. 2. Baskı. Anatech.
D. C. Sheehan. B. B. Hrapchak. 1980. Theory and practice of histotechnology. Battelle Press. Colombus.
G. Clark. 1981. Staining procedures. Williams Wilkins.
Kullanım kılavuzu yayın bilgileri
Ürün, Sağlık Bakanlığı tıbbi tanı cihazı kayıt sistemine kaydedilmiştir. GBL® Gül Biyoloji Laboratuvarı, EN
ISO TS 9001: 2000 ve EN ISO TS 13485: 2003 tıbbi cihaz ve tıbbi tanı cihazı kalite yönetim sistemlerini
uygulamaktadır.
© Setin ve tek tek komponentlerde belirtilen markaların hepsi, GBL® Gül Biyoloji Laboratuvarı Sanayi Ticaret
Limited Şirketi tescilli markalarıdır.
© Bu kullanım kılavuzunun her hakkı saklıdır. Önceden izin alınmadan alıntı yapılamaz ve çoğaltılamaz.
Revizyon numarası-01
İlk Yayın Tarihi: 19.03.2013
Revizyon Tarihi: 20.03.2013