piyasadaki türk ve yabancı kökenli çayların fenolik madde
Transkript
piyasadaki türk ve yabancı kökenli çayların fenolik madde
ATATÜRK ÇAY VE BAHÇE KÜLTÜRLERĠ ARAġTIRMA ENSTĠTÜSÜ MÜDÜRLÜĞÜ TĠCARĠ OLARAK PĠYASADA SATILAN TÜRK VE YABANCI KÖKENLĠ ÇAYLARIN BAZI FENOLĠK MADDE VE KAFEĠN ĠÇERĠKLERĠNĠN BELĠRLENMESĠ NESRĠN SAĞLAM Gıda Mühendisi Kubilay TÜRKYILMAZ Deneme ve Islah Kısım Müdürü RĠZE-2007 ĠÇĠNDEKĠLER 1. AMAÇ 1 2. GĠRĠġ 2 2.1 Çayın Yapısında Bulunan Kimyasal BileĢikler 2 2.1.2 Çayın Yapısında Bulunan En Önemli Flavanoller 3 2.1.3 Çay Polifenollerinin Ġnsan Sağlığı Üzerindeki Etkileri 6 2.1.4 DeğiĢik Çaylarda Bulunan Flavanoid BileĢiklerinin Miktarları 9 2.2 Çayın Yapısında Bulunan En Önemli Alkoloidler 11 2.2.1 DeğiĢik Çaylarda Bulunan Kafein Miktarları 12 2.2.2 Kafeinin Ġnsan Sağlığı Üzerindeki Etkileri 13 2.3 Çayın Yapısında Bulunan Önemli Fenolik Asitler 13 2.3.1 Gallik Asidin Ġnsan Sağlığı Üzerindeki Etkileri 14 3. MATERYAL VE YÖNTEM 15 3.1 Materyal 15 3.2 Yöntem 16 3.2.1 Kalibrasyon Eğrilerinin Hazırlanması 17 3.2.2 Analiz KoĢulları ve Örneklerin Analizi 22 4. SONUÇLAR 23 5. DEĞERLENDĠRME 38 6. KAYNAKLAR 41 7. EKLER 0 1. AMAÇ 1984 yılından sonra Türk çay sektöründe devlet tekelinin kalkmasıyla birlikte ticari olarak çok farklı isim ve kalitede siyah çay piyasaya sürülmüĢtür. Bununla birlikte özellikle son dönemlerde Çaykur’un öncülüğünde yeĢil çayında tüketicilere sunulmasıyla piyasada ürün çeĢitliliği de artmıĢtır. Yapılan bu çalıĢmada; ticari olarak piyasada satılan bazı Türk ve yabancı kökenli çaylar ile Çaykur tarafından deneme üretimi gerçekleĢtirilen beyaz çayın bazı fenolik madde ve kafein içeriklerinin belirlenmesi amaçlanmıĢtır. Kafein ve fenolik madde içerikleri çayın sahip olduğu karakteristik tat ve aroma üzerinde en büyük etkiye sahip olan bileĢiklerdir. Bu bileĢiklerin miktarlarının tespit edilmesi piyasada çok çeĢitli isim ve marka adı altında bulunan çaylar arasında Çaykur tarafından üretilen çayların konumlarının belirlenmesinde önemli rol oynayacaktır. 1 2. GĠRĠġ Bilimsel ismi Camellia sinensis(L) O.Kuntze olan çay bitkisinin iĢleme için uygun fiziksel özelliklere sahip ve kalite parametrelerini yoğun Ģekilde içeren tepe tomurcuğu ile taze yapraklarının farklı üretim aĢamalarından geçirilmesi ile son ürün olarak baĢta siyah çay olmak üzere yeĢil çay, oolong çay ve beyaz çay gibi değiĢik çay çeĢitleri elde edilmektedir. Dünya genelinde üretilen çayların % 70’i siyah, % 23’ü yeĢil, % 7’si oolong, instant, beyaz çay vb. çay çeĢitlerinden oluĢmaktadır. 2.1 Çayın Yapısında Bulunan Kimyasal BileĢikleri Çayın yapısında çok farklı yapıda ve özellikte kimyasal bileĢikler bulunmaktadır. Bunlar baĢlıca Ģu gruplar altında toplanmıĢtır. - Enzimler - Polifenoller - Alkoloidler - Azotlu bileĢikler - Karbonhidratlar - Pigmentler - Vitaminler - Organik asitler - Mineraller Polifenolik bileĢikler, çayın tadı, aroması ve kalitesi üzerinde önemli etkiye sahiptirler. Farklı Ģekillerde üretilen ve ticari olarak piyasaya sürülen çayların içerdiği polifenolik bileĢiklerinin miktarları, hammadde olarak kullanılan yaĢ çayın tipine, çevre Ģartlarına, toprak ve iklim özellikleri ile üretim Ģekillerine bağlı olarak büyük farklılıklar gösterir. 2 Polifenolik bileĢiklerin en önemli grubunu oluĢturan flavonoidler Ģu alt sınıflara ayrılmıĢlardır: - Flavanoller - Flavonoller - Flavonlar - Flavanonlar - Isoflavonlar - Antosiyanidinler Daha öncede belirtildiği gibi bu araĢtırmada farklı ticari çayların yapısında bulunan flavanol bileĢiklerin en önemlileri ile kafein ve gallik asit miktarları tespit edilmiĢtir. 2.1.2 Çayın Yapısında Bulunan En Önemli Flavanoller Çayın yapısında bulunan flavanol bileĢiklerinin en önemlileri ve bu bileĢiklerin açık formülleri Ģu Ģekildedir. Şekil 1; (C) Kateşin Şekil 2; (EC) Epikateşin 3 Şekil 3; (EGC) Epigallokateşin Şekil 4; (EGCG) Epigallokateşin gallat Şekil 5; (ECG) Epikateşin galat 4 Çayın yapısında bulunan flavanoller, siyah çay üretimi sırasında kondenzasyona uğrayarak daha büyük molekül yapısına sahip olan teaflavin bileĢiklerine dönüĢürler. En önemli teaflavinler Ģunlardır: Şekil 6; (TF) Teaflavin Şekil 7; (TF-3-MG) Teaflavin 3 monogallat Şekil 8; (TF-3’-MG) Teaflavin 3’ monogallat Şekil 9; ; (TF-3,3’-DG) Teaflavin 3,3’ digallat 5 2.1.3 Çay Polifenollerinin Ġnsan Sağlığı Üzerindeki Etkileri Direkt olarak tedavi edici olarak görülmemekle birlikte, araĢtırmalarda toplanan bulgular göstermiĢtir ki, fenolik bileĢiklerin antioksidan etkisi pek çok hastalığın önleyicisi olabilmektedir. Çayda bulunan polifenollerin etkileri Ģu Ģekilde sıralanabilir; Tümör geliĢimini ve yayılımını önler (hücre zarı çoklu doymamıĢ yağ asitlerinin peroksidasyona duyarlılığını azaltarak, serbest radikal oluĢumunda görev alan enzim sistemini inhibe ederek), Vitamin P etkisi olarak bilinen, kılcal damarlarda kanama ve çatlamaları engelleyici etkileri bulunmaktadır, H. pylori’ nin (bir bakteri türü) neden olduğu gastrik hastalıkların kontrolünde kullanılabilir, Human papilloma virüsünün (HPV) neden olduğu cervical lesion’ların (rahim yolunda oluĢan anormal değiĢiklik) tedavisinde etkili bir terapi olabilmektedir, Normal hücreleri, kanserli hücrelerin yayılımından korur, Güçlü bir antioksidandır, Cilt için bir anti-inflamatuar gibi (enfeksiyon sonucu oluĢan iltahaplanmalara karĢı) kullanılabilir, Meme kanseri riskini düĢürür, Akciğer kanseri riskini düĢürür, Alkol kullananlarda oluĢabilecek kanser riskini düĢürür, Sigara içenlerde oluĢabilecek kanser riskini düĢürür, PCP (pentaklorofenol) kirleticilerinin sebep olduğu kanser riskini düĢürür, Rahim yolu kanseri tedavisinde kullanılmıĢtır, Tümör geliĢimine karĢı prostatı korur, Tümör geliĢimine karĢı mesaneyi korur, 6 Açlık esnasında oluĢan mide zafiyatından korur, Beyinde lipit peroksidasyonunu azaltır, Cilt tümörü tedavisinde kullanılabilir, Kemik iliği lösemili hücrelerinin büyümesini kontrol altında tutar, Atherosklerosis’i (damar tıkanıklığı) önler, Serbest radikal öğütücüdür, Parkinson hastalığını önleyebilir, Periodontal hastalıkların tedavisinde kullanılabilir, Meme kanseri tümörlerinin geliĢimini durdurur, Kataraktı önlemeye yardımcı olabilmektedir, Bozulmaya uğramıĢ sinir hücreleri hastalıklarının tedavisinde etkili olabilir, Diabet tedavisinde yararlıdır, Alkolün karaciğere verdiği zararları önleyebilir, Boğaz kanserini önleyebilir, Romatizma iltihaplanmalarını azaltır, Toplam kolesterol seviyelerini azaltır, Ġsemik (tıkanıklık, pıhtılaĢma vb. sonucu) kalp hasarlarını önler, Alzheimer hastalığını önleyebilir, Kellik tedavisinde kullanılabilir, Kolon (kalın bağırsak) kanseri riskini düĢürür. Ġmmun sistem hücrelerini uyarır. Çayın kanser üzerindeki etkilerinin araĢtırıldığı bir çalıĢmada değiĢik çay çeĢitlerinin farklı kanser türleri üzerindeki etkileri üzerinde Ģu bulgular elde edilmiĢtir. 7 YER ÇAY TĠPĠ Ağız YeĢil çay ETKĠSĠ 6 ay uygulamadan sonra lezyonlarda % 37.9 kısmi azalma Yemek YeĢil çay borusu Siyah çay Mide YeĢil çay Siyah çay Etkisiz Günde 7 fincan veya daha fazla yeĢil çay tüketenlerde kanser riskinde % 31’e varan azalma 200 g/ay’a kadar tüketen erkeklerde kanser Pankreas YeĢil çay riskinde % 12, kadınlarda % 53; 200 g/ay’dan fazla tüketen erkeklerde % 43, kadınlarda % 47 azalma Günde 2 veya daha fazla fincan çay Kolorektal Siyah çay tüketenlerde kolon kanser riskinde % 4, rektum kanseri riskinde % 44, kolorektumda % 21 azalma Farelerle yapılan çalıĢmada, çay+UV ıĢın Deri Siyah çay uygulanan grupta su+UV ıĢın verilen gruba göre % 30-42 daha az keratoakantoma ve % 26-33’den daha az squamus deri tümörü Farelerle yapılan çalıĢmada, çay+4metilnitrozamin-1-(3-piridil)-1-bütanon Akciğer Siyah çay uygulanan grupta su+ 4-metilnitrozamin-1-(3piridil)-1-bütanon uygulanan gruba göre tümör oluĢumunda % 24 azalma, mevcut tümör boyutlarında % 38 küçülme Prostat Ġdrar kesesi YeĢil çay 2 fincan/gün’den çok çay tüketenlerde kanser Siyah çay riskinde % 30 azalma YeĢil çay Kadınlarda kanser riskinde % 50 azalma Şekil 10; Çay Tüketimiyle Bazı Kanser Türleri Arasındaki İlişki (Trevisanato ve Young-In Kim, 2000) 8 2.1.4 DeğiĢik Çaylarda Bulunan Flavanol BileĢiklerinin : Miktarları DeğiĢik çay çeĢitlerinin yapısında bulunan önemli flavanoid bileĢiklerinin miktarlarının tespiti için yapılan çalıĢmalarda kullanılan çay çeĢitlerine bağlı olarak çok farklı sonuçlar elde edilmiĢtir. AĢağıdaki tablolarda bu amaçla yapılan bazı çalıĢmalar ve bu çalıĢmalarda bulunan sonuçlara iliĢkin değerler verilmektedir. EC miktarı (%) YAPILAN ARAġTIRMA Brezilya çaylarında yapılan bir araĢtırmada (YeĢil çay) Brezilya çaylarında yapılan bir araĢtırmada (Siyah çay) Beecher, 1998; Leeve Ong, 2000 ve diğer( YeĢil çay) Beecher, 1998; Leeve Ong, 2000 ve diğer( Siyah çay) Prof. Dr. Burhan Kacar ( YaĢ çay) 0,8-1,2 0,540 0,55-0,87 0,040 1-3 Japonya'da yapılan bir çalıĢma( Siyah çay- Darjeeling) 0,320 Japonya'da yapılan bir çalıĢma( Çin yeĢil çayı) 0,430 Japonya'da yapılan bir çalıĢma ( YeĢil çay-Matcha) 0,450 Japonya'da yapılan bir çalıĢma ( YeĢil çay-Sencha) 0,970 Prof Dr. Sedat Velioğlu- AÜ (YeĢil Çay) 0,700 Hindistan çaylarında yapılan bir araĢtırma (YeĢil çay) <0,07 Tablo 2; Değişik çay çeşitleri için yapılan farklı araştırmalarda bulunan EC değerleri 9 C miktarı (%) YAPILAN ARAġTIRMA Brezilya çaylarında yapılan bir araĢtırmada (YeĢil çay) <0,1 Prof. Dr. Burhan Kacar ( YaĢ çay) 1-2 Japonya'da yapılan bir çalıĢma( Siyah çay- Darjeeling) 0,220 Japonya'da yapılan bir çalıĢma( Çin yeĢil çayı) 0,050 Japonya'da yapılan bir çalıĢma ( YeĢil çay-Matcha) 0,010 Japonya'da yapılan bir çalıĢma ( YeĢil çay-Sencha) 0,006 Hindistan çaylarında yapılan bir araĢtırma (YeĢil çay) Tablo 3; Değişik çay çeşitleri için yapılan farklı araştırmalarda bulunan C değerleri <0,1 EGC Miktarı (%) YAPILAN ARAġTIRMA Beecher, 1998; Leeve Ong, 2000 ve diğer( YeĢil çay) Beecher, 1998; Leeve Ong, 2000 ve diğer( Siyah çay) 0,44-0,88 0,190 Prof. Dr. Burhan Kacar ( YaĢ çay) 3-6 Japonya'da yapılan bir çalıĢma( Siyah çay- Darjeeling) 1,130 Japonya'da yapılan bir çalıĢma( Çin yeĢil çayı) 1,970 Japonya'da yapılan bir çalıĢma ( YeĢil çay-Matcha) 2,880 Japonya'da yapılan bir çalıĢma ( YeĢil çay-Sencha) 6,270 Prof Dr. Sedat Velioğlu- AÜ (YeĢil Çay) 2,220 Tablo 4; Değişik çay çeşitleri için yapılan farklı araştırmalarda bulunan EGC değerleri ECG Miktarı (%) YAPILAN ARAġTIRMA Beecher, 1998; Leeve Ong, 2000 ve diğer( YeĢil çay) Beecher, 1998; Leeve Ong, 2000 ve diğer( Siyah çay) Prof. Dr. Burhan Kacar ( YaĢ çay) 1,95-2,91 0,800 3-6 Japonya'da yapılan bir çalıĢma( Siyah çay- Darjeeling) 1,800 Japonya'da yapılan bir çalıĢma( Çin yeĢil çayı) 1,410 Japonya'da yapılan bir çalıĢma ( YeĢil çay-Matcha) 0,860 Japonya'da yapılan bir çalıĢma ( YeĢil çay-Sencha) 1,550 Prof Dr. Sedat Velioğlu- AÜ (YeĢil Çay) 4,580 Tablo 5; Değişik çay çeşitleri için yapılan farklı araştırmalarda bulunan ECG değerleri 10 EGCG Miktarı (%) YAPILAN ARAġTIRMA Brezilya çaylarında yapılan bir araĢtırmada (YeĢil çay) 5,8-8,4 Brezilya çaylarında yapılan bir araĢtırmada (Siyah çay) 0,160 Beecher, 1998; Leeve Ong, 2000 ve diğer( YeĢil çay) 13,37-13,74 Beecher, 1998; Leeve Ong, 2000 ve diğer( Siyah çay) 0,300 Prof. Dr. Burhan Kacar ( YaĢ çay) 9-13 Japonya'da yapılan bir çalıĢma( Siyah çay- Darjeeling) 5,730 Japonya'da yapılan bir çalıĢma( Çin yeĢil çayı) 4,910 Japonya'da yapılan bir çalıĢma ( YeĢil çay-Matcha) 5,240 Japonya'da yapılan bir çalıĢma ( YeĢil çay-Sencha) 8,710 Prof Dr. Sedat Velioğlu- AÜ (YeĢil Çay) 5,110 Hindistan çaylarında yapılan bir araĢtırma (YeĢil çay) 0,4-0,9 Tablo 6; Değişik çay çeşitleri için yapılan farklı araştırmalarda bulunan EGCG değerleri YAPILAN ÇALIġMA TF TF-3-MG TF-3'-MN TF-3,3'DG 0,13-0,16 0,25-0,31 0,72-0,90 0,46-0,5 0,16-0,30 0,31-0,42 0,21-0,31 0,47-0,53 USDA ( Siyah Çay) 0,036-0,53 0,006-0,32 0,012-0,41 0,006-0,50 USDA ( YeĢil Çay) 0,002-0,008 0,001-0,003 0,000-0,001 0,000-0,003 N.Tükmen, S. Velioğlu (Ortodoks yöntem Siyah Çay) N.Tükmen, S. Velioğlu (Çaykur yöntem Siyah Çay) Tablo 7; Değişik çay çeşitleri için yapılan farklı araştırmalarda bulunan TF değerleri 2.2 Çayın Yapısında Bulunan En Önemli Alkoloidler Çayın yapısında bulunan alkoloid bileĢiklerin en önemlileri Ģunlardır; - Kafein - Teobromin - Teofillin 11 Bu araĢtırma çayda bulunan en önemli alkoloid olan kafeinin miktarı üzerinde çalıĢılmıĢtır. Kafein molekülünün açık formülü Ģu Ģekildedir. Şekil 10; ; Kafein molekülü 2.2.1 DeğiĢik çaylarda bulunan kafein miktarları Yurt dıĢında ve ülkemizde farklı çay çeĢitlerinin kafein içerikleri üzerinde yapılan değiĢik araĢtırmalarda Ģu sonuçlar elde edilmiĢtir. KAFEĠN MĠKTARI (%) YAPILAN ARAġTIRMA Brezilya çaylarında yapılan bir araĢtırma (YeĢil çay) Prof. Dr. Burhan Kacar ( YaĢ çay) 2,3 - 3 3-4 Japonya'da yapılan bir çalıĢma( Siyah çay- Darjeeling) 3,240 Japonya'da yapılan bir çalıĢma( Çin yeĢil çayı) 2,610 Japonya'da yapılan bir çalıĢma ( YeĢil çay-Matcha) 3,620 Japonya'da yapılan bir çalıĢma ( YeĢil çay-Sencha) 2,940 Prof Dr. Sedat Velioğlu- AÜ (YeĢil Çay) 1,9 Hindistan çaylarında yapılan bir araĢtırma (YeĢil çay) Beyaz çay 4 - 4,8 3,1 - 3,6 Ankara Ġl Kontrol Laboratuarı ( Siyah Çay) 2,42 Tablo 8; Yapılan farklı çalışmalarda değişik çay çeşitlerinde bulunan kafein miktarları 12 2.2.2 Kafeinin Ġnsan Sağlığı Üzerindeki Etkileri Farmakolojik olarak aktif bir orta seviyeli merkezi sinir sistemi (MSS) uyarıcısıdır. Beyin kafein etkilerine en duyarlı organdır. Kafein tüketimi; kolaylaĢtırır, hafızayı motor güçlendirir, yetenekleri geliĢtirir mantıklı ve düĢünmeyi görsel-duyusal reaksiyonu hızlandırır. Uyanıklık süresinin artması yada uyku isteğinin geri atılması kafein tüketiminin en önemli sonucudur. Performansı etkiler,yorgunluk halini ortadan kaldırır. Kafeinin enerji harcanıĢını doza bağlı bir Ģekilde artırdığı ispatlanmıĢtır. Çay Ģekersiz içilerek, vücut ağırlığı kontrolünde ve azaltılmasında tavsiye edilebilir. Ġdrar söktürücüdür. (Ġdrar söktürücü özelliğinden dolayı zayıflama rejimlerinde kullanılmaktadır. ) 2.3 Çayın Yapısında Bulunan Önemli Fenolik Asitler Çayın yapısında bulunan fenolik asitlerin önemlileri Ģunlardır: - Gallic Acid - Coumaric Acid - Chlorogenic Acid - Caffeic acid 13 Bu çalıĢmada araĢtırmaya konu olan çay örneklerinde sadece gallik asidin miktarı incelenmiĢtir. Şekil 11; ; Gallik asit molekülü 2.3.1 Gallik Asidin Ġnsan Sağlığı Üzerindeki Etkileri Yapılan çalıĢmalarda gallik asidin insan sağlığı üzerinde Ģu etkilere sahip olduğu anlaĢılmıĢtır; - Anti fungal ve anti viral özelliklere sahiptir. - Antioksidant olarak oksidatif zararlara karĢı hücrelerin korunmasına yardımcı olur. - Sağlıklı hücrelere zarar vermeden kanser hücrelerine karĢı sitotoksik etki gösterdiği belirlenmiĢtir. - Ġç hemoroidlerde pekiĢtirici ilaç olarak kullanılmıĢtır - Albüminiri ve Ģeker hastalıklarında da tedavi için kullanılmaktadır. - Sedef ve bazı dıĢ hemoroid hastalıklarının tedavisinde kullanılan ilaçlar gallik asit içerir. 14 3. MATERYAL VE YÖNTEM 3.1 Materyal Bu araĢtırmada Rize’deki değiĢik marketlerden satın alınan, yurt dıĢından temin edilen ve Çaykur tarafından deneme üretimi yapılan beyaz çay da dahil olmak üzere toplam 18 adet çay numunesi kullanılmıĢtır. AraĢtırma konusu olan çay örneklerinin ticari isimleri Ģunlardır: - Çaykur YeĢil Süzme Çay 40g, ÇAYKUR - Çaykur Burcum YeĢil Çay 100g, ÇAYKUR - Lipton Yeni YeĢil Çay, LĠPTON - DoğuĢ YeĢil Çay Limonlu, DOĞUġ ÇAY - Çaykur Siyah Rize Çayı 500g, ÇAYKUR - Lipton Siyah Yellow Lable,500g, LĠPTON - Ofçaysan Çay Filizi 500g, OFÇAYSAN - Ofçay Filiz 500g, OFÇAYSAN - DoğuĢ Karadeniz 500g, DOĞUġ ÇAY - Filiz Çay Prenses 500g,FĠLĠZ ÇAY - Özçay Siyah Çay 250g, ÖZÇAY - Özçay Organik Siyah Çay 250g, ÖZÇAY - Açık Siyah Çay - Lipton Ġthal Siyah Çay - Sencha Japon YeĢil Süzme Çay - Hojicha Japon YeĢil Süzme Çay - Beyaz Çay, ÇAYKUR - Matcha Japon KavrulmuĢ YeĢil Çay 15 3.2 Yöntem Analiz yöntemi olarak ISO 14502-2 (HPLC Kullanılarak Siyah ve YeĢil Çayda Bulunan KateĢin Ġçeriğinin ve Karakteristik BileĢenlerin Tespiti) kullanılmıĢtır. Analiz için kullanılan ve bilgisayar tarafından kumanda edilen HPLC( Yüksek Basınçlı Sıvı Kromatografisi) sistemi Ģu konfigürasyondan oluĢmaktadır. - Degaz Ünitesi: (Spectra SYSTEM SCM 1000, Thermo ) - Gradient Pompa: (Spectra SYSTEM P4000, Thermo ) - Otosampler: (Spectra SYSTEM AS3000, Thermo ) - PDA Dedektör: (Spectra SYSTEM UV6000LP, Thermo ) - Analitik kolon: (Luna 5µ C18, 4,6*250mm, Phenomenex) HPLC sisteminin bilgisayar tarafından kumanda edilebilmesi için ChromQuest 4,0 ticari yazılım programı kullanıldı. Kullanılan cihaz konfigürasyonuna bağlı olarak ISO 14502-2 yöntemi için öngörülen mobil fazın yapısında modifikasyon yapıldı. Analiz edilecek bileĢiklerin kalitatif ve kantitatif tayinleri ile HPLC sisteminin kalibrasyonu için kullanılan referans standart maddeler SIGMA-ALDRICH Inch. firmasından temin edildi. 16 3.2.1 Kalibrasyon Eğrilerinin Hazırlanması AraĢtırma için seçilen deney örneklerinin analizine baĢlanmadan önce temin edilen referans standart maddeler kullanılarak miktar tespiti yapılacak olan kalite bileĢiklerinin kalibrasyon eğrileri hazırlandı. Kalibrasyon eğrilerinin hazırlanması için kullanılan analiz yönteminde belirtilen konsantrasyonlarda standartlar hazırlanarak HPLC sistemine verildi. Bunun sonucunda elde edilen tipik kromatogram aĢağıdaki Ģekilde çıkmıĢtır. Şekil 12; Gallik asit, kafein ve kateşin standartlarına ait kromatogram 17 Hazırlanan farklı konsantrasyonlardaki standartlara karĢı HPLC’nin vermiĢ olduğu alanlar kullanılarak her bir bileĢiğin kalibrasyon eğrisi hazırlandı. Buna göre hazırlanan kalibrasyon eğrileri ve bu kalibrasyon eğrilerinin korelasyon katsayıları(R2) Ģu Ģekilde bulundu. GALLİK ASİT 3.000.000 ALAN 2.500.000 2.000.000 1.500.000 1.000.000 R2 = 0,9998 500.000 0 0 5 10 15 20 25 KONSANTRASYON(PPM) Şekil 13; Gallik asit standardına ait kalibrasyon eğrisi KAFEİN 25.000.000 ALAN 20.000.000 15.000.000 10.000.000 R2 = 0,9953 5.000.000 0 0 50 100 150 KONSANTRASYON(PPM) Şekil 14; Kafein standardına ait kalibrasyon eğrisi 18 200 250 KATEŞİN 10.000.000 ALAN 8.000.000 6.000.000 4.000.000 R2 = 1 2.000.000 0 0 50 100 150 200 250 KONSANTRASYON(PPM) Şekil 15; Kateşin standardına ait kalibrasyon eğrisi ALAN EPİKATEŞİN 7.000.000 6.000.000 5.000.000 4.000.000 3.000.000 2.000.000 1.000.000 0 R2 = 0,9999 0 50 100 150 KONSNANTRASYON(PPM) Şekil 16; Epikateşin standardına ait kalibrasyon eğrisi 19 200 250 EPİGALLOKATEŞİN 2.000.000 ALAN 1.500.000 1.000.000 R2 = 0,9985 500.000 0 0 50 100 150 200 250 KONSANTRASYON(PPM) Şekil 17; Epigallokateşin standardına ait kalibrasyon eğrisi EPİGALLOKATEŞİN GALLAT 25.000.000 ALAN 20.000.000 15.000.000 10.000.000 R2 = 0,9999 5.000.000 0 0 100 200 300 400 500 KONSANTRASYON(PPM) Şekil 18; Epigallokateşin gallat standardına ait kalibrasyon eğrisi EPİKATEŞİN GALLAT 20.000.000 ALAN 15.000.000 10.000.000 R2 = 0,994 5.000.000 0 0 50 100 150 KONSANTRASYON(PPM) Şekil 19; Epikateşin gallat standardına ait kalibrasyon eğrisi 20 200 250 ALAN TEAFLAVİN 350.000 300.000 250.000 200.000 150.000 100.000 50.000 0 R2 = 0,9988 0 1 2 3 4 5 6 KONSANTRASYON(PPM) Şekil 20; Teaflavin standardına ait kalibrasyon eğrisi TEAFLAVİN-3,3'-DİGALLAT 600.000 ALAN 500.000 400.000 300.000 200.000 R2 = 0,9992 100.000 0 0 1 2 3 4 5 6 KONSANTRASYON(PPM) Şekil 21; Teaflavin-3,3’-digallat standardına ait kalibrasyon eğrisi TEAFLAVİN-3-MONOGALLAT 1.000.000 ALAN 800.000 600.000 400.000 R2 = 0,9987 200.000 0 0 1 2 3 4 KONSANTRASYON(PPM) Şekil 22; Teaflavin-3-monogallat standardına ait kalibrasyon eğrisi 21 5 6 TEAFLAVİN-3'-MONOGALLAT 500.000 ALAN 400.000 300.000 200.000 R2 = 0,9982 100.000 0 0 1 2 3 4 5 6 KONSANTRASYON(PPM) Şekil 23; Teaflavin-3’-monogallat standardına ait kalibrasyon eğrisi 3.2.2 Analiz KoĢulları ve Örneklerin Analizi Piyasadan temin edilen çay örnekleri ISO14502-2 yönteminde belirtilen Ģekilde hazırlanarak ikili paralel olarak HPLC’de analiz edildi. HPLC çalıĢma koĢulları aĢağıdaki Ģekilde hazırlandı - Enjeksiyon Miktarı : 10µl - Kolon Fırın Sıcaklığı : 35ºC - Mobil Faz AkıĢ Hızı : 1ml/dakika o Mobil Faz A : 20µg/ml EDTA içeren %3 Asetik Asit, %9 Asetonitril Çözeltisi o Mobil Faz B : 20µg/ml EDTA içeren %3 Asetik Asit, %80 Asetonitril Çözeltisi - Dedeksiyon Dalga Boyu : 278nm 22 Sistemdeki mobil faz gradient elusyon programı aĢağıdaki Ģekilde oluĢturuldu SÜRE (dakika) 0,0 10,0 25,0 35,0 35,1 45,0 MOBĠL FAZ A (%) 100 100 68 68 100 100 MOBĠL FAZ B (%) 0 0 32 32 0 0 Tablo 9; Gradient elusyon programı 4. SONUÇLAR Bu Ģartlar altında yapılan paralel analizler sonucunda elde edilen değerlerin ortalamaları alınarak deney numunesi olarak kullanılan çaylardaki bileĢiklerin miktarları % olarak tespit edilmiĢtir. Elde edilen sonuçlar tablo 10’da gösterilmiĢtir. Her bir bileĢik için farklı çay örneklerinde bulunduğu miktarları gösteren grafiklerde Ģekil 24 ile Ģekil 35 arasında gösterilmiĢtir. Bu grafiklerdeki değerler büyükten küçüğe doğru sıralanmıĢtır. Ayrıca her bir örnek için alınan kromatogramlar ekler kısmında sunulmuĢtur. 23 ÖRNEK ĠSĠMLERĠ Gallik asit EGC C Kafein EGCG EC ECG TF TFDG TF-3-MG TF-3'-MG ÇAYKUR YEġĠL SÜZME 40GR 0,031 3,439 0,036 1,969 6,423 0,645 0,944 0,016 0,007 0,002 0,007 ÇAYKUR BURCUM YEġĠL ÇAY 100 GR 0,036 3,920 0,044 2,141 6,579 0,747 1,008 0,015 0,009 0,004 0,008 LĠPTON YENĠ YEġĠL ÇAY 0,094 2,496 0,094 2,590 7,319 0,747 2,076 0,009 0,008 0,008 0,013 DOĞUġ YEġĠL ÇAY LĠMONLU 0,056 2,783 0,038 1,832 5,200 0,612 0,834 0,011 0,007 0,004 0,007 ÇAYKUR SĠYAH RĠZE ÇAYI 500GR 0,105 0,054 0,001 2,743 0,372 0,482 0,049 0,121 0,137 0,130 0,109 LĠPTON YELLOW LABEL SĠYAH ÇAY 500GR 0,140 0,109 0,001 2,314 0,175 0,592 0,047 0,117 0,139 0,158 0,123 OFÇAYSAN ÇAMLICA FĠLĠZĠ 500GR 0,124 0,040 0,001 2,072 0,122 0,473 0,019 0,171 0,155 0,166 0,162 OFÇAY FĠLĠZ 500GR 0,150 0,158 0,000 2,065 0,116 0,365 0,024 0,127 0,124 0,128 0,118 DOĞUġ KARADENĠZ 500GR 0,122 0,065 0,000 2,397 0,160 0,570 0,040 0,156 0,161 0,173 0,147 PRENSES (FĠLĠZÇAY) 500GR 0,187 0,059 0,001 2,218 0,128 0,426 0,032 0,208 0,172 0,152 0,139 ÖZÇAY 250GR 0,141 0,134 0,001 2,204 0,096 0,320 0,063 0,128 0,134 0,120 0,115 ÖZÇAY (ORGANĠK) 250GR 0,223 0,247 0,001 1,718 0,127 0,347 0,060 0,119 0,142 0,161 0,141 AÇIK SATILAN SĠYAH ÇAY 0,163 0,115 0,000 2,154 0,163 0,607 0,038 0,135 0,175 0,222 0,159 LĠPTON ĠTHALSĠYAH ÇAY 0,340 0,064 0,019 3,640 0,775 0,667 0,603 0,179 0,115 0,127 0,095 SENCHA (JAPON YEġĠL ÇAY) 0,030 4,212 0,049 2,794 7,366 0,912 1,085 0,010 0,005 0,000 0,018 HOJICHA(JAPON YEġĠL ÇAY) 0,779 0,132 0,094 2,768 0,860 0,091 0,027 0,006 0,004 0,004 0,009 BEYAZ TÜRK ÇAYI 0,075 1,632 0,115 3,615 9,154 0,849 2,854 0,029 0,014 0,010 0,023 MATCHA((JAPON YEġĠL ÇAY) 0,052 3,573 0,061 2,923 7,120 0,920 Tablo 10; Değişik çay örneklerindeki kafein, gallik asit ve önemli flavanol bileşiklerinin miktarları( % ) 1,151 0,010 0,003 0,004 0,020 24 A FÇ D N LA YS A O W Ç LI Y A Ç Y A ZÇ İZ 25 0G R R Y R A Ç 50 0G H Sİ YA R 00 G Y) 5 A Fİ L H YA Sİ Y N Ö A FÇ M A EL B O ZÇ LA TI SA 0,223 Şekil 24; Analiz edilen farklı çay örneklerine ait Gallik Asit miktarları 25 0,122 0,030 0,031 0,036 0,052 0,056 0,075 0,094 0,105 0,100 0,124 0,140 0,141 0,150 0,163 0,187 0,200 O YE LL IK Lİ 0,300 50 C O A Ğ 0G Ç U Fİ A R Ş L YK İZ K A U İ 50 R R A 0G Sİ D YA EN R H İZ R 50 İZ Lİ 0G E PT Ç R A O YI N 50 YE 0G N İY R E D B Şİ O E L Ğ YA Ç U Z A Ş Y TÜ YE M R Ç Ş A K A İL TC YK Ç Ç H A A U A YI Y R ((J L B İM A U PO R O C N N U LU YE M Ç YE Şİ A YK L Şİ Ç L U A Ç R Y) A Y Y SE EŞ 10 N İL C 0 H S G A Ü R Z (J M A E PO 40 N G R YE Şİ L Ç A Y) PT O N Lİ Ç )2 50 G Y Y) A Ç A Ç A H İK N LS İY A G A R (F İ (O İT H 0,340 0,400 A SE S Y A ZÇ YE Şİ L 0,779 0,800 EN Ö PO N (J A A H PT O N Lİ C JI 0,900 PR O H TİCARİ OLARAK PİYASADA SATILAN BAZI TÜRK VE YABANCI ÇAYLARIN GALLİK ASİT İÇERİKLERİ (%) 0,700 0,600 0,500 0,000 A Ç Y A Ç 10 0 YE Şİ L Y) 1,000 0,500 Şekil 25; : Analiz edilen farklı çay örneklerine ait Epigallokateşin miktarları 26 0,064 0,065 0,109 0,115 0,132 0,040 0,054 0,059 0,000 0,134 2,496 2,500 0,158 0,247 2,000 1,632 3,000 3,573 3,439 3,500 2,783 4,000 3,920 4,212 4,500 R PO A ((J YE Şİ L PO N (J A M A H U YK A TC U A H C R U A M B C SE N Ç R U YK 5,000 N G R YE Y D E Ş O Şİ İL Ğ L Ç U A SÜ Ş Y) YE ZM Şİ E L 40 Lİ Ç G A PT R Y O L N İM YE O N N LU İY E B Şİ EY L Ö A ZÇ Ç Z A A Y TÜ Y R (O K R Ç G A A YI N O İK FÇ )2 A 50 Y G Fİ R Lİ H Z O 50 JI Ö 0G C Lİ H ZÇ R PT A A (J O Y A N 25 PO A YE Ç 0G N IK LL R YE SA O Şİ W TI L LA LA Ç A N B Y) EL Sİ YA S D İY H O A Ğ Ç H U A Ç Ş Y A K Y A 50 R Lİ A 0G PT D EN R O N İZ PR İT 50 H EN 0G A Ç L S A R Sİ ES YK YA (F U H R İL O Ç Sİ İZ FÇ A Ç YA Y A A H Y) YS R 50 A İZ N 0G E Ç Ç R A A M YI LI 50 C A 0G Fİ R Lİ Zİ 50 0G R A Ç TİCARİ OLARAK PİYASADA SATILAN BAZI TÜRK VE YABANCI ÇAYLARIN (EGC)EPİGALLOKATEŞİN İÇERİKLERİ ( % ) 1,500 Şekil 26; Analiz edilen farklı çay örneklerine ait Kateşin miktarları 27 PR Ç H SE S A Zİ Fİ Lİ ZÇ A Y A Ç 50 0G G R 50 0 Y R A Ç 40 G A H E LU R 0,000 0,000 0,000 0,001 0,001 0,001 0,001 0,001 0,001 0,000 Lİ (F İ C LI H LS İY A Sİ YA M A EL B EN N YS A A LA İT SÜ ZM G Y) Y) Y) A O N 0 10 Lİ M Y Ç A Ç A 0,061 0,038 0,044 0,049 0,036 0,019 0,020 R Y) 50 Ö 0G Ö ZÇ ZÇ Ç R A A A Y YK Y (O 25 U R R 0G G Sİ A R YA N İK H )2 R D 50 İZ O E G Ğ R U Ç Ş A Y K I5 A R 00 A A Ç G D IK R EN SA İZ TI 50 LA 0G N R Sİ O Y A FÇ H A Ç Y A Fİ Y Lİ Z 50 0G R FÇ PT O N Y A Ç A Ç YE Şİ L L YE Şİ YE Şİ L YE Şİ L YE Şİ L Ç Y YI A Ç A Ç 0,040 O O W Lİ N PO N PO (J A M R U YK A Ş Ğ U U A H C C R U O D B Ç R U A ((J YE Şİ L EŞ İL K 0,060 YE LL YK A H PO N İY R 0,080 PT O N Lİ A Ç TC (J A A YE N TÜ 0,094 0,094 0,100 SE N A H C JI Z 0,115 0,120 M O H EY A PT O N Lİ B TİCARİ OLARAK PİYASADA SATILAN BAZI TÜRK VE YABANCI ÇAYLARIN (C)- KATEŞİN İÇERİKLERİ (%) 0,140 Y) Y) A Ç A R İZ Ç Lİ E A Lİ PT Y) Ç PT A O Y O N I5 D N YE O 00 YE Ğ N G U İ LL R YE Ş O K Şİ W A L R LA A Ç D A B EN Y EL İ Z Sİ PR 50 YA EN 0G H SE R Ç A S Y (F 50 İL 0G İZ Ç R A Y) Ç 50 A A YK Ç 0G Ö I Z K U R Ç R SA A Y B TI U 25 LA R 0G O C N U FÇ R M S A İY YE YS A Şİ H A L N Ç A Ç Ç Y A A Y M LI 10 C 0 A G Fİ R L O İ Ç Zİ FÇ A 50 YK A 0G Y U R Fİ R Lİ YE D Z Şİ O 50 Ğ L 0G U SÜ Ş R YE ZM Şİ E L Ö 40 Ç ZÇ G A R A Y Y L İ (O M O R N G LU A N İK )2 50 G R H YE Şİ L YE Şİ L Ç A YI Ç Y A Ç Şekil 27; Analiz edilen farklı çay örneklerine ait Kafein miktarları 28 2,065 2,072 2,141 2,154 2,204 2,218 1,500 1,000 0,500 0,000 1,718 1,832 1,969 2,000 2,314 2,397 2,500 2,590 2,743 2,768 2,794 2,923 3,000 YA PO N K R YE Şİ L TÜ A H 3,500 Sİ N PO N (J A A (J A H JI C R YK U Ç A H O A PO A ((J H A LS İY A EY A Z B İT H 3,615 3,640 4,000 C H SE N A TC M Lİ PT O N TİCARİ OLARAK PİYASADA SATILAN BAZI TÜRK VE YABANCI ÇAYLARIN KAFEİN İÇERİKLERİ ( % ) 4,500 B EY A Z TÜ (J R A K PO Ç A Lİ N YI PT YE O Şİ M N L A Ç YE TC A Ç YK A N H Y) İY A U ( R EŞ (J B A İL U PO R Ç C N A U Y YE M Şİ Ç YE A L Şİ YK Ç L A U Ç Y) R A YE Y D 10 Şİ O L Ğ 0 U G SÜ Ş R ZM YE H Ş E O İL 40 JI Ç G C A H R Y A L (J İ M A PO O N Lİ N LU P Ç TO Lİ YE A PT YK N Şİ O L İT U N R Ç H YE A A Sİ Y) LS YA LL İ YA O H W R H İZ LA Ç E A B Ç Y EL A Y Sİ I5 YA 00 A Ç G H IK R Ç A SA Y TI 50 D LA O 0G Ğ N R U S Ş İY K A A PR H R EN A Ç D A SE EN Y S İZ (F 50 İL Ö 0G İZ Z O Ç Ç R FÇ A A Y A Y) YS (O 50 R A 0G G N A R Ç N A İK M )2 LI C 50 A G Fİ R Lİ O Z FÇ İ5 00 A Y G Fİ R Lİ Z 50 0G Ö ZÇ R A Y 25 0G R A SE N C H 2,000 1,000 29 Şekil Şekil 28; Analiz edilen farklı çay örneklerine ait Epigallokateşin Galat miktarları 0,160 0,163 0,175 0,096 0,116 0,122 0,127 0,128 0,000 0,372 0,775 6,000 6,423 6,579 7,120 7,000 0,860 8,000 5,200 9,000 7,319 10,000 7,366 11,000 9,154 TİCARİ OLARAK PİYASADA SATILAN BAZI TÜRK VE YABANCI ÇAYLARIN (EGCG)EPİGALLOKATEŞİN GALLAT İÇERİKLERİ ( % ) 5,000 4,000 3,000 R İT H A Ç A YE Şİ L K A 0 Y YI A Ç A Ç Y) Y) A Ç Ç 10 EŞ İL R Y İY YE N TÜ YE Şİ L YE Şİ L D YE Şİ L 0,200 0,091 0,400 Şekil 29; Analiz edilen farklı çay örneklerine ait Epikateşin miktarları 30 0,473 0,347 0,320 0,570 0,592 0,607 0,482 0,365 0,645 0,612 0,600 0,426 0,747 0,667 0,912 0,920 0,849 0,747 0,800 U YK M PT O N Lİ U C Z EY A PT O N Lİ R U A B Ç R U YK B N PO N (J A PO A 1,000 G LS R İY A O H Ğ U Ç Lİ SÜ Ş A PT Y YE ZM O Ş E N İ L A 40 YE Ç Ç IK G A LL R Y SA O L W İM TI O LA LA N N B LU EL Sİ Y Sİ A D YA H O Ğ Ç Ç H U A A Ç Ş Y YK A K Y A U 50 R R O A 0G Sİ D FÇ YA EN R A H YS İZ R 50 A İZ N 0G E Ç Ç R A A M YI PR LI 50 C EN A 0G SE Fİ R L S İZ (F İ5 İL 00 İZ G Ç R A O Y) FÇ 50 Ö A ZÇ 0G Y F A R İL Y İZ (O 50 R G 0G A R N İK H )2 O JI 50 Ö C G H Z Ç R A A (J Y A PO 25 0G N YE R Şİ L Ç A Y) A Ç A H ((J A H C TC SE N A M TİCARİ OLARAK PİYASADA SATILAN BAZI TÜRK VE YABANCI ÇAYLARIN (EC)- EPİKATEŞİN İÇERİKLERİ (% ) 0,000 Lİ PT O N Şekil 30; Analiz edilen farklı çay örneklerine ait Epikateşin Gallat miktarları 31 N A C LI Y A İZ R R Y) 50 0G A İ5 00 G İZ Fİ L Ç Y R Ç A 0G R 0G 50 YE Şİ L A Y) H 50 R G R 50 0 Sİ YA Fİ L PO N FÇ A M Ç O N EN İZ ZÇ Lİ (F İ (J A A H C JI YS A A FÇ O SE S D LA SA TI A R Y A Ç R 00 G 50 G YI 5 A Ç )2 R Y 0,047 0,049 0,060 0,063 0,019 0,024 0,027 0,032 0,038 0,040 0,000 H Ç IK EN PR A E YA H Sİ İZ İK N 25 0G Ç A O N LU R R Y) G A Y) 40 G A H Y ZÇ A G A E 0 10 Lİ M LS İY A Y A Ö H Y SÜ ZM Ç R R K A EL B Ğ U Ş LA O D O W (O YA H Sİ Y A ZÇ L İT YE Şİ A Ç Ç A Y 0,500 O YE LL Ö R U YK A Ş PT O N Lİ Ğ U YE Şİ L YE Şİ L YE Şİ L Ç Ç A YI Ç A 1,085 1,151 0,603 0,834 0,944 1,008 1,000 Ç O D R U M YE Şİ L EŞ İL K R 1,500 A YK U N PO N (J A A PO İY TÜ 2,076 2,500 R C U B A H C SE N ((J A H YE N Z 2,854 3,000 Ç R U YK A Ç TC A M PT O N Lİ B EY A TİCARİ OLARAK PİYASADA SATILAN BAZI TÜRK VE YABANCI ÇAYLARIN (ECG)- EPİKATEŞİN GALLAT İÇERİKLERİ ( % ) 3,500 2,000 YS A A FÇ PT O N Lİ İT Lİ Z (F İ A Ç H Y) 50 N 0G A Ç L R Sİ A M YA L D IC H O A Ç Ğ A U Fİ Y Ş Lİ K Z A İ5 R A 00 A Ç D IK G E R SA N İZ TI 50 LA 0G N R Sİ YA H Ö Ç Ç Z A A Ç Y YK A O Y FÇ U 2 R A 50 Y Sİ Lİ G F Y R PT İL A H İZ O R N 50 Ö İZ YE ZÇ 0G E LL Ç A R A Y O YI W (O 50 R LA G 0G B A EL R N İK Sİ )2 YA 50 H G R Ç A Ç B Y Ç A E A YK 50 YA YK 0G U Z U R R TÜ R YE B R Şİ U K R L Ç C A SÜ U YI M ZM YE D O E Şİ Ğ 40 L U G Ş Ç R A YE Y M Şİ A 1 TC L 00 Ç H G A A R Y ((J Lİ SE A M PO N O C N N H LU A YE (J Şİ A L PO Ç Lİ A N PT Y) YE O H Ş N O İL YE JI Ç C N A H İY Y) A (J EŞ A İL PO Ç N A YE Y Şİ L Ç A Y) O SE S PR EN 0,050 Şekil 31; Analiz edilen farklı çay örneklerine ait Teaflavin miktarları 32 0,006 0,009 0,010 0,010 0,011 0,015 0,016 0,029 0,156 0,117 0,119 0,121 0,127 0,128 0,135 0,150 0,179 0,200 0,171 0,250 0,208 TİCARİ OLARAK PİYASADA SATILAN BAZI TÜRK VE YABANCI ÇAYLARIN TEFLAVİN ( TF ) İÇERİKLERİ ( % ) 0,100 0,000 D O Ö Ç A D EN İZ Y) A R Y A Ç 50 0G H Sİ YA ZÇ A R A K M LI C A Ş Ğ U N YS A A YE LL FÇ N Şekil 32; Analiz edilen farklı çay örneklerine ait Teaflavin -3,3’- digallat miktarları 33 0,003 0,004 0,005 0,007 0,007 0,008 0,009 0,014 0,050 0,115 0,124 0,134 0,137 0,139 0,142 0,150 0,155 0,161 0,172 0,175 0,200 50 0G ZÇ F R A İ L Y O İZ (O W İ5 R LA 00 G Ç G A B A R N E YK L İK Sİ )2 U YA R 50 Sİ H G YA R Ç A H Y R 50 İZ 0G E Ç R A YI 50 Ö 0G ZÇ R A O Y FÇ 25 A Lİ 0G Y PT Fİ R O L N İZ Ç İT 50 A H YK 0G A LS U R R İY B B A EY U H R A Ç C Z A U Y M TÜ YE R K Şİ Ç L Lİ A Ç PT YI A O Y Ç N A 10 YK YE 0 U N G R İY R Y E EŞ D Ş O İL İL Ğ Ç U S A Ş Ü Y YE ZM SE Şİ E L N 40 C Ç G H A R A Y (J Lİ H A M O PO O JI N C N LU H YE A (J M Şİ A A L PO TC Ç A N H Y) A Y ((J EŞ A İL PO Ç A N Y) YE Şİ L Ç A Y) PT O N Lİ O LA TI (F İL İ SA SE S EN PR IK Ç A PİYASADA SATILAN BAZI TÜRK VE YANABCI ÇAYLARIN TEAFLAVİN -3,3'-DİGALLAT ( TFDG) İÇERİKLERİ ( % ) 0,100 0,000 U YK A R Y (O Lİ Z (F İ H İK 50 G )2 Y A R R G R 50 0 Ç İ5 00 G Y A Ç N İZ Fİ L G A R A Sİ YA SE S EL A B EN LA PR O W LI C H Sİ YA EN İZ N D A R LA TI A K M A Ş Ç ZÇ N Ö YS A Ğ U Şekil 33; Analiz edilen farklı çay örneklerine ait Teaflavin -3- monogallat miktarları 34 0,004 0,004 0,004 0,004 0,000 0,002 0,000 0,008 0,010 0,050 0,120 0,127 0,128 0,130 0,152 0,150 0,158 0,161 0,166 0,173 0,200 Ç YE LL A FÇ O SA 0,222 0,250 50 0G Sİ Ç YA R A Y) H R 50 İZ 0G E Ç R A O YI FÇ 50 A Lİ 0G Y PT Fİ R O L N İZ İT 50 H 0G A LS R İY A H Ç Ö A ZÇ Y A B Y Ç EY 25 A YK A 0G Lİ Z PT U R T R Ü O B R N U K YE R Ç C N A U İY YI M E YE D Ş O İL Şİ Ğ Ç L U A Ş Ç Y A YE Y H Şİ O 10 L JI 0 Ç C G A H R Y A (J Lİ M A M A PO TC O N N H LU A Y ((J EŞ Ç A A İL YK PO Ç U A N R Y) Y Y E EŞ SE Şİ L İL N Ç C A SÜ H Y) A ZM (J A E PO 40 N G R YE Şİ L Ç A Y) PT O N Lİ O D IK Ç A PİYASADA SATILAN BAZI TÜRK VE YABANCI ÇAYLARIN TEAFLAVİN-3-MONOGALLAT ( TF-3-MG) İÇERİKLERİ ( % ) 0,300 0,100 H YA R Ö Y A İZ Fİ L Y A Ç ZÇ Y A FÇ H YA R 50 0G R G R 50 0 50 0G R 0G R Y R A )2 50 G Y) A ZÇ Lİ İK N G A 50 H Ç İ5 00 G Sİ YA İZ EN İZ N D A R (F İ (O Sİ O EL B SE S Sİ LA R U YK A O W EN Y A R A K Fİ L 0,040 0,020 Şekil 34;: Analiz edilen farklı çay örneklerine ait Teaflavin -3’-monogallat miktarları 35 0,000 0,007 0,007 0,008 0,009 0,013 0,018 0,109 0,115 0,095 0,100 0,020 0,023 0,123 0,139 0,118 0,120 Lİ 0,147 0,159 0,162 0,141 0,140 Ç YE LL PR ZÇ Ş Ğ U LA TI A C 0,160 Ö O D SA LI M A Ç IK Ç A N YS A A FÇ 0,180 25 İZ 0G PT E Ç O R A N YI İT 50 H A 0G LS R M İ YA B A E TC H YA Ç H Z A A TÜ Y ((J SE R A N K PO C Ç H N A A YI Y (J EŞ A İ PO L Lİ Ç N A PT Y) Y O EŞ H Ç N O A İ L YE JI YK C Ç N H U A İ A R Y) Y (J EŞ B A U PO İL R C Ç N U A M YE Y Ç Y A Ş EŞ YK İL İL Ç U A R Ç Y) A Y D Y EŞ O 1 Ğ İL 00 U SÜ Ş G YE R ZM Şİ E L 40 Ç A G Y R Lİ M O N LU PT O N Lİ O TİCARİ OLARAK PİYASADA SATILAN BAZI TÜRK VE YABANCI ÇAYLARIN TEAFLAVİN-3'-MONOGALLAT ( TF-3'-MG ) İÇERİKLERİ ( % ) 0,200 0,080 0,060 A PO K R YE Şİ L TÜ Ç YI A Ç 4,000 2,000 Şekil 35; Analiz edilen farklı çay örneklerine ait toplam kateşin miktarları 36 0,000 0,614 0,647 0,654 0,663 0,782 0,834 0,923 0,924 0,958 1,203 2,129 10,000 12,299 12,733 11,487 12,000 12,826 13,623 14,000 9,466 16,000 14,604 18,000 A Lİ N Y) PT YE O Ş N B İL U YE Ç R A C N Y) U İ YE M Ç YE Ş A İL Şİ YK Ç L A U Ç Y R A YE Y D 10 Şİ O L Ğ 0 U G SÜ Ş R ZM YE Şİ E L 40 Lİ Ç G PT A R Y O L N İ H M İT O O H JI N A C LU LS Ç H Lİ A A İY PT YK (J A A O U H PO N R Ç YE N Sİ A Y YA YE LL O H Şİ W L R İZ Ç LA A E Y) B Ç EL A Y Sİ I5 YA 00 A Ç G H IK R Ç A SA Y TI 50 D LA O 0G Ğ N R U S Ş İY K A A H R Ö A Ç ZÇ D A EN Y A Y İ Z (O 50 R 0G G O A R FÇ N İK O A )2 YS FÇ 50 A A N Y G R Fİ Ç A L M İZ LI PR 50 C 0G EN A Fİ R SE Lİ S Zİ (F 50 İL 0G İZ Ç R A Y) 50 0G Ö ZÇ R A Y 25 0G R R U YK A Ç Z PO N (J A EY A B ((J A H A H C TC M A SE N PİYASADA SATILAN BAZI TÜRK VE YABANCI ÇAYLARIN TOPLAM KATEŞİN ( C+EC+EGC+EGCG+ECG) İÇERİKLERİ ( % ) 8,000 6,000 5. DEĞERLENDĠRME Ticari olarak piyasada satılan çayların yapılarındaki kimyasal bileĢiklerin kompozisyonları etkileyen bir çok önemli husus vardır. Bunların baĢlıcaları Ģunlardır; - Hammaddenin genetik özellikleri - Ġklim ve çevre koĢulları - Bölge ve toprak farklılıkları - ĠĢleme yöntemi - Depolama Ģartları ve süreleri Yaptığımız çalıĢmada yukarıdaki parametrelerden bağımsız olarak deney numunesi olarak seçilen ticari çayların analizleri gerçekleĢtirilmiĢtir. Analizlerden elde edilen sonuçları değerlendirirken bu durumun göz önüne alınması gerekir. ISO 14502-2 yöntemini kullanarak piyasada ticari olarak satılan değiĢik çay örnekleri üzerinde yapmıĢ olduğumuz bu çalıĢmada elde edilen verilerle ilgili olarak yapmıĢ olduğumuz değerlendirmeler Ģu Ģekildedir. - Bu çalıĢma kapsamında yapılan analizlerin sonuçları, doğruluklarının kontrolü amacıyla yabancı literatürlerde verilen sonuçlar ile karĢılaĢtırılmıĢtır. KarĢılaĢtırmada görülmüĢtür ki bulunan analiz sonuçları yabancı literatürlerde verilen aralıklarda çıkmıĢtır. 37 - Siyah çay, yeĢil çay ve beyaz çay örnekleri arasındaki teaflavinler ve bazı önemli flavanol bileĢiklerinin (kateĢinler) miktarları arasında aĢağıdaki Ģekilde gösterilen genel durum aynen saptanmıĢtır. Şekil 36; Beyaz, yeşil ve siyah çayın kateşin ve teaflavin seviyeleri - Çaykur tarafından üretilen yeĢil çayların toplam kateĢin içerikleri Japon yeĢil çaylarına çok yakın değerde çıkmıĢtır. YeĢil çay iĢlemede kullanılan hammaddenin kalitesinin arttırılması ile Japon yeĢil çayları ile aynı toplam kateĢin içeriğine sahip ürün elde edilebilir. - Çaykur ve diğer yeĢil çayların teaflavin içeriklerinin az oluĢu üretim aĢamalarında enzim inaktivasyonunun iyi yapıldığını ve kateĢinlerin kondenzasyonunun önlendiğini ortaya koymaktadır. - Beyaz çay üretimini sadece soldurma ve kurutma aĢmalarından meydana gelir. Kafein miktarı da soldurma aĢamasında arttığı için beyaz çaydaki kafein miktarı diğer çaylardan daha yüksek çıkmıĢtır. 38 - Beyaz çayda hiç olmaması gereken teaflavinlerin az olsa tespit edilmesi tomurcukların hasadı sırasında sap kısımlarında bulunan kateĢinlerin oksidasyonu ile oluĢtuğu düĢünülmektedir. Sonuç olarak yapılan bu çalıĢma az sayıdaki ticari çay örneğinin yapısındaki önemli fenolik bileĢiklerin miktarlarının tespitine yönelik olarak gerçekleĢtirilmiĢtir. Bundan sonraki çalıĢmamızda piyasada ticari olarak satılan daha fazla sayıdaki çay örneğinin analiz edilerek diğer fenolik bileĢiklerin de miktarlarının tespit edilmesi planlanmaktadır. 39 KAYNAKÇA 1. Acar J., Saldamlı Ġ.,1998. Fenolik BileĢikler ve Doğal Renk Maddeleri, Gıda Kimyası Kitabı Hacettepe Ünivers,itesi Yayınları. Ankara 435:443. 2. Anonymous, 2004. TS ISO 10727: Çay ve Katı Haldeki Çözünebilir Çay- Kafein Ġçeriğinin Tayini- Yüksek Performanslı Sıvı Kromotografi Yöntemi. 3. Anonymous, 2002. ISO 14502-2 Methods for determination of substrances characteristic of gren and black tea- Part 2: Determination of catechins in gren tea – Method using high performance liquid chromatography 4. Baysal A., Beslenme ve Sağlığımızda Çayın Önemi. Hacettepe Üniversitesi Beslenme ve Diyetetik Bölümü. Ankara 5. Caffin N., D’Arcy B., Yao L., Gavin Rintoul, 2004. Developing an Index of Quality for Australian Tea. The University of Queensland. 6. Eisei Nishitani, and Yuko M. Sagesaka, 2003. Simultaneous determination of catechins, caffeine and other phenolic compounds in tea using new HPLC method. Central Research Institute, ITO EN Ltd., 21 Mekami, Sagara-cho, Haibara-gun, Shizuoka 421-0516, Japan. 7. Ilgaz ġ., Kalcıoğlu Z., Sarımehmet M., 2005. 2004 Yılı 1. Sürgün Dönemine Ait Çaykur YeĢil Çay Nevilerinin Kalite Parametrelerinin Belirlenmesi ve Yabancı Ülkelerde Üretilen YeĢil Çaylarla Mukayesesi Ġle Ġlgili Bir ÇalıĢma, Rize. 40 8. Kacar B.,1987. Çayın Biyokimyası ve ĠĢleme Teknolojisi . Ankara 9. Samuel T. Saito; Albert Welzel; Edna S. Suyenaga; Francie Bueno, 2006. A method for fast determination of epigallocatechin gallate (EGCG), epicatechin (EC), catechin (C) and caffeine (CAF) in green tea using HPLC 10. Tosun Ġ., KARADENĠZ B.,2000. Çay Ve Çay Fenoliklerinin Antioksidan Aktivitesi. O.M.Ü. Mühendislik Fakültesi Gıda Mühendisliği Bölümü, SAMSUN. 11. TokuĢoğlu Ö., 2001. Siyah Çayların BaĢlıca Fenolik BileĢenleri ( Flavanoller, Flavonoller, Tanninler) ve Aroma Özellikleri Üzerine AraĢtırmalar, Ġzmir. 12. Yao L., Jiang Y., Datta N., Singanusong R., Liu X., Duan J., Raymont K., Lisle A., Xu Y.,2003. HPLC analyses of flavanols and phenolic acids in the fresh young shoots of tea (Camellia sinensis) grown in Australia 13. Yılmaz E.,2001. Kafein Alımının Metabolik Hız ve Enerji HarcanıĢına Etkileri, Gıda Mühendisliği Dergisi Ankara . Sayı 11 30-34. 14. Yıldız H., Baysal T., 2003. Bitkisel Fenoliklerin Kullanım Olanakları ve Ġnsan Sağlığı Üzerine Etkileri, Gıda Mühendisliği Dergisi. Ankara. Sayı14 29:35 15. Zheng G, Sayama K, Okubo T, Juneja LR, Oguni I. Anti- obesity effects of three major components of green tea, catechins, caffeine and theanine, in mice. Department of Applied 41 Biological Chemistry, Faculty of Agriculture, University, 836 Ohya, Shizuoka-shi 422-8529, Japan. 16. www.biriz.biz.com 17. www.fao.org 18. www.genbilim.com 19. www.mdidea.com/products/herbextract/tp/egcg2.gif 20. www.mumsad.org.tr/files/doc/OPD_cay_raporu.doc 21. www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez 22. www.sciencedirect.com 23. www.scielo.br/img/revistas/cta/v26n2/30188t2.gif 24. www.supplementwatch.com 25. www.teacoffeeasia.com/news.asp?id=529 26. www.tr.net/saglik/beslenme_sagligi_cay.shtml#1 27. www.upasitearesearch.org 28. www.wikipedia.org 42 Shizuoka