Salisilat hidroksilaz yöntemi - XXVII. Ulusal Biyokimya Kongresi / 3

Salisilat hidroksilaz yöntemi - XXVII. Ulusal Biyokimya Kongresi / 3

ÜÇ FARKLI YÖNTEMDE SALİSİLAT
KONSANTRASYONUNA GÖRE
İNTERFERANS DEĞERLENDİRİLMESİ
Arzu ALYAKUT
04.11.2015
AMAÇ

Salisilat (asetilsalisilik asit) en sık kullanılan
antiinflamatuar ve antipiretik ilaçlardandır.

Salisilat zehirlenmesi, çocuklarda ve yetişkinlerde yanlış kullanıma
veya intihar girişimleri sonucu sık görülmektedir.

Klinik laboratuvarlarda salisilat konsantrasyonunu ölçmek için
birçok teknik kullanılmaktadır:
 kolorimetri
 yüksek
 gaz
analjezik,
ve florometri (en sık)
performanslı likid kromatografi
kromatografi
 ultraviyole
 floresan
spektroskopi
spektroskopi
Effects of hemolysis and lipemia on the COBAS salicylate and acetaminophen assays compared to GDS assays. Meany D1, Schowinsky J, Clarke W. Clin
Biochem. 2008 Dec;41(18):1486-8.

Tüm bu yöntemler hemoliz, lipemi, ikter gibi interfere edicilerden
farklı oranlarda etkilenebilmektedir.

Bu çalışmada, farklı salisilat konsantrasyonlarına sahip örneklerde
salisilat ölçümünün hemoliz, lipemi ve bilirubin interferans
etkilerinin
 Ferrik
 EMIT
nitrat yöntemi,
(Enzyme multiplied immunoassay technique),
 Salisilat
hidroksilaz yöntemleri
karşılaştırılması amaçlanmıştır.
üzerindeki
etkilerinin
Lippi G, Salvagno GL, Montagnana M, Brocco G, Guidi GC. Influence of hemolysis on routine clinical chemistry testing. Clin Chem Lab Med 2006; 44:311–6.
GEREÇ VE YÖNTEM

10, 30, 100 ug/mL üç farklı konsantrasyonda
havuzları oluşturuldu.

Herbiri beş farklı konsantrasyonu içerecek şekilde hemoliz, bilirubin ve
lipemi interferans çalışması için CLSI EP07-A protokolüne göre hazırlandı:


Hemoglobin (0-500 mg/dL),

Bilirubin (0-20 mg/dL) ve

Trigliserid (0-3000 mg/dL)
salisilat içeren serum
Elde edilen sonuçlar, CLIA-88 kriterlerine göre ±%10 sapmaya kadar kabul
edilebilir olarak değerlendirildi.
Interference Testing in Clinical Chemistry;. Approved Guideline—Second Edition. CLSI EP7-A2
U.S. Dept. of Health and Human Services. Medicare, Medicaid, and CLIA Programs: regulations implementing the Clinical Laboratory Improvement Amendmenth of
1988(CLIA). Final Rule. Fed Regist 1992;57:7002-186.

Ferrik nitrat yöntemi:

Thermo Scientific cihazı ile Thermo Scientific® kiti,

Salisilatın ferrik nitrat ile oluşturduğu demir kompleksinin 540 nm’deki
absorbans ölçümü temeline dayanmaktadır.
 EMIT®

yöntemi:

Siemens viva E SYVA cihazı ile Siemens Emit® kiti,

Emit® yöntemi (Enzyme multiplied immunoassay technique)
homojen immun yöntem olup,
340 nm’de NAD’nin NADH‘a
dönüşümünü ölçülmektedir.
Salisilat hidroksilaz yöntemi:

Roche Integra 400 plus cihazı ile Roche Cobas® kiti,

Salisilatın ortamda NADH varlığında salisilat hidroksilaz ile katekol ve
NAD’ye dönüşümünü 340 nm’deki absorbans azalması ile
ölçülmektedir.
BULGULAR
GRAFİK 1. Hemolizin salisilat konsantrasyonu üzerine etkisi
1A. Hemolizin (0-500 mg/dL hemoglobin konsantrasyonlarının) 10 ug/mL salisilat düzeyine etkisi
1B. Hemolizin (0-500 mg/dL hemoglobin konsantrasyonlarının) 30 ug/mL salisilat düzeyine etkisi
1C. Hemolizin (0-500 mg/dL hemoglobin konsantrasyonlarının) 100 ug/mL salisilat düzeyine etkisi
GRAFİK 2. Lipeminin salisilat konsantrasyonu üzerine etkisi
A. Lipeminin (0-3000 mg/dL trigliserid konsantrasyonlarının) 10 ug/mL salisilat düzeyine etkisi
B. Lipeminin (0-3000 mg/dL trigliserid konsantrasyonlarının) 30 ug/mL salisilat düzeyine etkisi
C. Lipeminin (0-3000 mg/dL trigliserid konsantrasyonlarının) 100 ug/mL salisilat düzeyine etkisi
GRAFİK 3. İkterin salisilat konsantrasyonu üzerine etkisi
A. İkterin (0-20 mg/dL bilirubin konsantrasyonlarının) 10 ug/mL salisilat düzeyine etkisi
B. İkterin (0-20 mg/dL bilirubin konsantrasyonlarının) 30 ug/mL salisilat düzeyine etkisi
C. İkterin (0-20 mg/dL bilirubin konsantrasyonlarının) 100 ug/mL salisilat düzeyine etkisi
TARTIŞMA ve SONUÇ

Salisilat ölçümünde kullanılan yöntemler için interferans
bilgilerinin bilinerek yola çıkılması yanlış hasta tedavisinin
önüne geçmesi açısından değerlidir.

Klinik laboratuvarlarda kullanılan yöntemler geliştirilirken
interferans çalışmaları da yapılmakta ve bu bilgiler
kullanıcılara sunulmaktadır.

Ancak interferans çalışmaları genellikle analit düzeyleri
belirlenmeksizin yapılmakta ya da üretici firmanın ilgili
dökümanlarında analit konsantrasyonları genellikle yer
almamaktadır.

Çalışmamızda farklı düzeylerde salisilat içeren örneklerin farklı
interfere edici ajanlarla değişen oranlarda etkileşimleri olabildiği
saptanmıştır.

İnterferans çalışmalarında kullanılan örneklerde ele alınan
analitlerin konsantrasyonlarının çok önemli olduğu,

Elde edilen bilgiler doğrultusunda farklı seviyelerde analit içeren
örneklerle yapılan uygulamaların terapötik ilaç izleminde daha
doğru sonuçlar sağlayacağı sonucuna varılmıştır.

Bu çalışmanın devamında interfere edicilerin salisilatın toksik
düzeyleri üzerindeki etkilerinin araştırılması planlanmıştır.
Teşekkürler…