MiKRODALGA KULLANIMI iLE TESPiT EDiLMiŞ SlÇAN

Transkript

MiKRODALGA KULLANIMI iLE TESPiT EDiLMiŞ SlÇAN
Vet. Hil.
Dcrg. (19%), 12,2:133-140
MiKRODALGA KULLANIMI iLE TESPiT EDiLMiŞ SlÇAN PARATiROiD
DOKULARININ IŞIK VE ELEKTRON MiKROSKOPTA iNCELENMESi
Mehmet Kanterı
Zeynep Kahveci2
Erdal Karaöz3
Şahin A. Sırmalı2
The Examination of Rat Parathyroid Tissues Fixed by Microwave Enhancement on
Light and Electron Microscopy
Summary : In this study, rat parathyroid (PT) tissues, fixed by microwave enhancement and by immersion fixation,
were compared to evaluate the quality differences between these two fixation methods. For the reason, a part of tis­
sues were exposed to microwave for 6 seconds at 50-55°C after fixed with 5% glutaraldehyde (GA) in 0.1 M sodium
phosphate for 1 O minutes. The other part of tissues were fixed in the same fixative for 3 h at 4°C.
Later, a routine
electron microscopic procedure was applied on both tissue groups. In examination of tissues fixed by microwave en­
hancement, many uniform cells besides very few number of light and dark cells were observed. However, in tissues
fixed by immersion fixation, many uniform cells besides smail number of light and dark cells were observed. In com­
parison of microwave enhancement fixation to immersion fixation, the appsarance of cells, fixed by microwave en­
hancement were more homogen but cell membranes were not clear in the light microscopy, rough endoplasmic re­
ticulum cisternae (RER) and mitochondria were slightly dilated in electron microscopy than immersion fixation. Finally,
there were no technical differences between two methods. However, the changes in parathroid cell morphology with
immersion fixation method were rarely observed in that with microwave enhancement fixation method.
Key words: Microwave, ımmersion, fixation. parathyroid, microscopy.
Özet : Bu çalışmada, sıçan paratiroid ( PT) dokularında mikrodalga ışınımı ile artırılmış fiksasyon ve immersiyon fik­
sasyon sonucu elde edilen preparatlarda, fiksasyon kalitesi açısından bir farklılı�ın bulunup bulunmadığı araştırıldı. Bu
amaçla, doku örneklerinin bir kısmı 0.1 M sodyum fosfat tamponu varlığında %5'1ik glutaraldehid (GA) içerisinde 1 O da­
kika bekletildikten sonra (ıslatma aşaması) 50-55°C'de
6 sn süreyle mikrodalga ışınımına tabi tutuldu. Diğer doku ör­
nekleri ise, aynı fiksatif içerisinde 4°C'de 3 saat bekletilerek tespit edildi. Daha sonra her iki doku örnekleri grubuna da
rutin elektron mikroskobik doku takibi işlemleri uygulandı. Mikrodalga ışınımı ile artırılmış fiksasyonla elde edilen pre­
paratların incelenmesinde, çok sayıda üniform �ücrenin yanısıra bir-iki adet açık ve koyu hücrelere; immersiyon fik­
sasyonla elde edilen preparatlarda ise, üniform hücrelerle birlikte az sayıda da açık ve koyu hücrelere rastlandı. Ay­
rıca, mikrodalga ışınımı ile artırılmış fiksasyonla elde edilen preparatların immersiyon fiksasyon sonucu elde edilenlere
göre, yarı ince kesitlerde, hücre görünümlerinin daha homojen, fakat hücre membranlarının yer yer belirsiz; ince ke­
sitlerde ise, granüllü endoplazmik retikulum sistemaları (ger) ve mitokondriyonların hafif dilale olduğu gözlendi. So­
nuçta, her ıki metod arasında teknik açıdan belirgin bir farklılığın olmadığı; ancak, paratiroid hücre morfolojisinde im­
mersiyon yöntemiyle gözlenen değişikliklerin, mikrodalga yönteminde çok nadir görüldüğü saptandı.
Anahtar kelimeler: Mikrodalga, immersiyon, fiksasyon, paratiroid, mikroskopi.
sirnde ısı artışı; radyasyonun düzeyine, materyalin
Giriş
fiziksel. termal ve dielek1rik özellikleri ile cismin şek­
Mikrodalga ışınımı. doku örneklerinin her �ok­
tasında istenilen ısının kısa sürede elde edilmesini
line bağlıdır (Kok ve Boon,
1990).
Fiksatifler,
gömme materyalleri ve boyalar mikrodalga ışınımı
ile doku blok ve kesitlerine daha hızlı penetre olur­
sağlayan etkili bir yöntemdir (Kok ve Boon, 1990).
lar. Doku proteinleri ısı yardımıyla doğrudan doğ­
doku örnekleri içten dışa doğru ısınır. Difüzyon iş­
lanır
Mikrodalga enerjisi ile yapılan ısıtma işleminde,
lemi ve kimyasal reaksiyonların hızı üzerine ısı"nın
artırıcı
1990).
bir
etkisi vardır
(Horobin ve
Flemming,
Mikrodalga ile ışınlanmış homojen bir ci-
ruya danatüre edilerek dokunun fiksasyonu sağ­
(Horobin
ve
Flemming,
1990).
Doku
kesitlerinin bayanması sırasında da mikrodalga fırın
kullanımı ile kısa sürede daha iyi· sonuç alındığı bil­
dirilmek1edir (Kennedy ve Foulis, 1989).
Geli Tarihi : 06.06. 1996
1. Y.Y.Ü. V eteriner Fakültesi Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, V AN.
2. U.Ü. Tıp Fakülte i Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, BURSA.
3. S.D.Ü.Tıp Fakültesi. Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, ISPARTA.
KANTER, KAHVECİ. KARAÖZ, SfRMALI
Bu metodun doku fiksasyonunda ilk kez 1970'li
yıllarda
kullanılmaya
(Kok ve Boon, 1990).
başlandığı
(inaktif) hücreler ve bu iki hürce tipi arasında geçiş
belirtilmektedir
formunu oluşturan intermediyer hücreler olarak ta­
Bu amaçla, çeşitli doku ör­
nımlandı (Roth ve Raisz, 1966; Roth ve Capen,
nekleri, farklı sıcaklık, süre ve fiksatifler kullanılarak
1974; Capen, 1980; Wild, 1980). Bununla birlikte,
mikrodalga fırında tespit edildi. Elde edilen sonuç
son çalışmalarda, çeşitli fiksasyon yöntemlerinin
incelendiğinde, immersiyon fiksasyona göre, ışık
(immersiyon, perfüzyon ve mikrodalga ışınımı ile ar­
veya elektron mikroskopik seviyelerde benz.er so­
tırılmış immersiyon) ve bu fiksasyonlarda kullanılan
nuçlar alındığı görüldü (Login, 1978; Leong ve ark.,
farklı fiksatif (GA, GA-FA vb.) ve tampon çözeltilerin
1985; Login ve Dovarak, 1985; Kayser ve ark.,
(Na-K/fosfat, Na-cacodilat, Hepes vb.) paratiroid
1988; Leong, 1988; Umar ve ark., 1990; Kahveci,
1993).
hücrelerinin
Deri üzerinde yapılan bir çalışmada, fik­
sasyon sonrası takip aşamalarında mikrodalga tırını
kullanılarak 15 dakikada bloklama işleminin ya­
pılabileceği gösterildi (Boon ve ark., 1986). Balaton
da,
fiksasyon,
dehidratasyon,
mikrodalga
fırınların
1988; Wild ve ark., 1989).
Bu çalışma, sıçan paratiroid dokularının birinci
fiksasyonu
gös­
rodalga ışınımı
öncesi
dokulwn
fiksatif içerisinde 15 dakika
fırınının
kul­
edilen preparatlar arasında, teknik açıdan bir fark­
sasyonda ısının ışınımdan daha etkili olduğu so­
ark.,
mikrodalga
preparatlar ile immersiyon fiksasyon sonucu elde
�dilen dokularla yapılan diğer bir çalışmada, tik­
(Hopwood ve
esnasında
lanılmasıyla elde edilen ışık ve elektron mikroskopik
termiştir (Balaton, 1987). Mikrodalga fırında fikse
nucuna varıldı
değişikliklere
1988; Setoguti ve ark., 1988; Shoumura ve ark. ,
saydamlaştırma,
kullanılabileceğini
önemli
ve ark., 1986; Marti ve ark., 1987; Emu ra ve ark.,
gömme ve kesitierin kurutulması aşamalarında kla­
sik
morfolojisinde
neden olduğu bildirilmektedir (Larsson, 1984; Wild
lılığın bulunup bulunmadığını ortaya koymak ve pa­
19138). Mik­
ratiroid hücre morfolojisini her iki yöntemle ayrıntılı
tespit olacağı
bi� şekilde incelemek amacıyla planlanmıştır.
bekletilmesi (ıslatma
y
aşaması) halinde morfolojik yapının daha i i ko­
runduğu gösterildi (Login ve Dovarak, 1988).
Formaldehid
veya
glutaraldehid
·
gibi
Materyal ve Metot
fik­
satiflerde immersiyon yöntemiyle tespit edilmiş pa­
Çalışmada, 4 adet 250-300 g ağırlığında Wiss­
ratiroid parankim hücrelerinin, insan ve memeli
tar Albino cinsi sıçanlar 5-7 mg/1OOg sodyum­
hayvanlarda farklı görünümlere sahip hücre top­
pentobarbital ile anestezi edildi. Bu sıçanların her
lulukları içerdiği kabul edilmektedir. Bu hücreler;
üniform,
açık,
iki paratiroid bezleri sterio mikroskop altında dik­
koyu ve multinükleer hücrelerdir
katlice alındıktan sonra, hemen buzla soğutulmuş
(Lever, 1957; Roth ve Raisz, 1966; Alten%ohr ve
Leonhardt,
1972;
Capen, 1980;
Berghdal
PBS ile yıkandı ve yaklaşık 1 mm3'1ük parçalara ay­
rıldı. Denemede ER 535 MT modelinde, iç boyutları
ve
Boquist, 1973;
Meuten ve ark., 1984). Önceleri
295x187x314 mm, 550 watt çıkış güçlü, mikrodalga
düşük yoğunluklu sitoplazmaları olan hücreler açık
salınımı 2450 MHz olan Vestei/Goldstar marka,
hücreler, yüksek yoğunluklu sitoplazmaya sahip
mutfak tipi mikrodalga fırın kullanıldı. Mikrodalga fı­
hücreler ise, koyu hucreler olarak adlandırıldı (Roth
ve
Capen,
1974).
Elektron
mikroskopik
rında özel bir kap içinde bulunan GA'nın ısısını sap­
ça­
tamak amacıyla güç, zaman ve sıcaklık ölçümleri
lışmaların başlamasıyla, koyu hücrelerin (aktif form)
yapıldı.
çok sayıda hücre organeline sahip olduğu, açık
Sıcaklık
ölçümlefi,
ışınım
uygulandıktan
hemen sonra mikrodalga fırıryın kapağı açılarak ci­
(inaktif form) hücrelerin ise, daha az sayıda organel
valı termometre ile alındı. Mikrodalga fırın güç se­
içerdiği gösterildi (Lever, 1957). Daha sonra, pa­
viyesi 1'de tutulduğunda 6 saniyede GA'nın sı­
caklığı, fiksasyon için uygun olduğu düşünülen 50-
ratiroid bezinde gözlenen farklı hücre tiplerinin sik­
lik değişiklik1erden kaynaklandığı kabul edildi. Buna
55 °C'de sabit kaldı. Doku örneklerinin bir kısmı, 0.1
göre, parathormon .sentezinden sorumlu hücreler
!
M sodyum fos at tamponu varlığında % 5'1ik glu­
sentez evrelerine göre; çok sayıda organel içeren
tara ldehid (GA) içerisinde 1 O dakika bekletildikten
koyu (aktif) hücreler, az sayıda organel içeren açık
1 34
Mikrodalga kullanımı ilc tesbit edilmiş sıçan paratiroid ddkularının ışık ve clektron ...
Tablo ı'. Farklı tespit yöntemleri uygulanan örnı: klerdeki PT hücre tipleri.
Fiksasyon metodu
Fiksatif
Tampon Çözelti
PT hücre varyasyonu
Mikrodalga ışınımı
%5GA
Sodyum fosfat
Çok sayıda üniform, bir iki adet açık
%5 GA
Sodyum fosfat
Çok sayıda üniform, az sayıda açık ve koyu hücre
ve koyu hücre
ile artınlmış fiksasyon
Immersiyon fiksasyon
sonra
50-55
oc
'de
6
saniye
süreyle
olduğu görüldü. Kromatin, düzenli bir yapı gösteren
mik­
çekleştirildi.
kalizasyonunda gözlendi.
Diğer doku örnekleri ise. aynı fiksatif
parinükleer
lo­
Üniform bir yapı gös­
teren hücrelerde, çoğunlukla hafif dilale olmuş gra­
içerisinde 4 °C'de 3 saat bekletilerek tespit edildi.
nüllü endoplazmik retikulum sistemalarma ve kıista
Daha sonra her iki gruba ait doku örnekleri 0.1 M
yapıları
sodyum fosfat tamponunda iki kez 1O' ar dakika sü­
seçilemeyen
mitokondriyonlara
rastlandı
(Şekil 2,3). Immersiyon fiksasyonda ise, hücrelerin
reyle yıkandı. Bu doku örnekleri 4 °C'de 1 saat sü­
plazma membranlarının oldukça katiantılı ve in­
reyle Os0 4 ile ikinci fiksasyona tabi tutuldu ve yı­
kama işlemi aynı şekilde tekrarlandı. Bu aşamadan
tersellüler mesafelerde yer yer genişlernelerin ol­
duğu gözlendi. Hücrelerde, çekirdek kesitlerinin dü­
sonra, her iki gruba ait doku örneklerine rutin eleki­
zensiz
ran mikroskobik takip yöntemleri uygulandı. Epon
ve
çok
sayıda
serbest
ribozom
içeren
sitoplazmik matliksin farklı yoğunlukta olduğu be­
bloklardan elde edilen yarı ince kesitler toluidin ma­
lirlendi. Granüllü endoplazmik retikulum sistemaları
visi, ince kesitler ise Mg-uranilasetat ve kurşun sit­
rat ile boyandı.
çoğunlukla
çekirdekterin
rodalgalama işlemine tabi tutularak fiksasyon ger­
normal yapılarını korlırken, mitokondriyonların yer
Preparatların ışık (Oiympus BHT)
yer dilale olduğu görüldü (Şekil 5, 6).
ve elektron (Zeiss EM-10) mikroskopik incelemeleli
·
yapılarak fotoğraflama işlemleri gerçekleştirildi.
Tartışma ve Sonuç
Bulgular
Isının fiksasyonu artırıcı bir etkiye sahip ol­
duğunun belirlenmesinden sonra, bu konuda mik­
Paratiroid hücre morfolojisine ait bulgular yu­
rodalga fırınlartarla pek çok çalışma yapılmıştır (Kok
karıdaki tabloda özetlenmiştir.
ve ark., 1988). Bir ısı çeşidi olan mikrodalga rad­
Mikrodalga ışınımı ile artırılmış fiksasyon ve im­
yasyonu,
mersiyon fiksasyon yöntemleri ile tespit edilmiş
hücrelere
rastlandı.
Bu
faklı
bir
rad­
vansiyonel bir fırına konan bir organ parçası, dıştan
toplazmaları farklı yoğunlukta boyanan polig.:>nal
parankimal
radyasyondan
yasyon türüdür (FeirabenrJ ve ark., 1992). Kon­
sıçan paratiroid bezlerinin, yarı ince kesitlerinde, si­
şekilli
iyonizan
hüc­
içe doğru
ısındığından, (Horobin ve
çekleşen
fiksasyon,
1990;
relerin, çok sayıda damar ve az miktarda bağ doku
Kok
ve
Boon,
1990)
dış
fiksatifin
Flemming,
bölümde ger­
derine
pe­
natrasyonunu engelleyen bir bariyer oluşturur (Ho­
ile birbirinden ayrılmış gruplar ve kısmen de küçük
robin ve Flemming, 1990).
failiküller oluşturduğu gözlendi (Şekil 1, 4).
Mikrodalga fırınlarda
ise, ısı artışına bağlı olarak kimyasal reaksiyonlar
Mikrodalga ışınımı ile artırılmış fiksasyonla elde
hızlandığından, liksatilin difüzyon gücü artar ve fik­
edilen preparatların incelenm�sinde çok sayıda üni­
sasyon işlemi içten dışa doğru gerçekleşir (Kok ve
form hücrenin yanısıra bir-iki adet açık ve koyu hüc­
Boon,
relere (�kil 1 ); immersiyon fiksasyonla elde edilen
1990).
Mikroqalgalama
fiksasyonu
için
uygun sıcaklığın 50-70 oc oldugu; bu sıcaklığın al­
preparatlarda ise, üniform hücrelerle birlikte az sa­
tında ve üstünde yapılan liksasyonlardan histolojik
yıda da açık ve koyu hücrelere rastlandı (Şekil 4).
olarak kötü sonuçlar alındığı bildirilmektedir (Hop­
Mikrodalga ışınımı ile tespit edilmiş preparatlarda,
wood ve ark., 1988; Kok ve Boon, 1990; Kahveci,
ince yapı düzeyinde, ·hücrelerin plazma memb­
1993).
Bu çalışmada da 50-55 °C'Iik sıcaktık kul­
lanılmıştır (Kok ve 8oon, 1990; Kahveci, 1993) ..
ranının az katiantılı ve intersellüler mesafelerin dar
135
KANTF.R. KAHVHCI. KARAÖ'l.. SIRMAU
Ülkemizde bu konuda yapılan çalışmalarda,
endoplazmik retikulum (ger) membranlarında ise,
daha çok patolojik materyaller kullanılmıştır. Bu ma­
yüzey genişlemelerine neden olduğunu göstermiştir
teryallerin laboratuvara ulaşana kadar geçen ıs­
(Wild ve Schraner, 1989).
tatma aşaması konusunda belli bir standart yoktur
fiksasyonda karaciğer, iskelet kası, periferal sinir,
(Umar
ve
ark.,
mik­
pankreas, tiroid ve adrenal korteks gibi dokularda
rodalgalama öncesi dokuların tespit olacağı fiksatif
membranların daha iyi korunduğu bildirilmiştir (Wild
içerisinde 15 dakika bekletilmesinin (ıslatma aşa­
ve ark., 1989).
1989).
Bununla
birlikte,
Mikrodalga ile artırılmış
ması) optimum sonuç verdiği bildirilmektedir (Login
Son yıllarda gerçekleştirilen birçok çalışmada,
ve Dovarak, 1988). Bu çalışmada da, doku par­
paratiroıd bezinde gözlenen 4 ayrı hücre tipinin
çalarının küçüklüğü de dikkate alınarak. ısiatma
(üniform, açık, koyu ve multinükleer hücreler) farklı
aşaması 10 dakika ile sınırlanmıştır.
fiksasyon metodlarından kaynaklanabileceğıne ıli�­
Bir çok araştırmada, mikrodalga fiksasyon yön­
kin önemli veriler elde edilmiştir (Lever, 1957; Roth
teminin, fiksasyon süresini kısahmasının yanısıra,
ve Raisz, 1966; Alten%ohr ve Leonhardt, 1972;
konvansiyonel fiksasyona eşit kalitede hatta bazı
Berghdal ve Boquist, 1973; Capen, 1980; Meuten
dokularda daha iyi kalitede ışık ve elekıran mik­
ve ark., 1984). Sıçan (Wild ve ark., 1985; Setoguli
roskopik preparatların elde edilmesine imkan sağ­
ve ark., 1988), çöl faresi (Larsson ve ark., 1984) ve
ladığı gösterilmiştir (Boon ve ark , 1986; Kok ve
kedilerde (Wild ve ark., 1986) perfüzyon fiksasyon
ark., 1988; Wild ve ark., 1989; Wild ve Schraner,
yöntemiyle paratiroid bezinde farklı hücre form­
1989; Kok ve Boon, 1990; Kahveci, 1993). Mor­
larının oluşumu önlenmıştir. Marti ve ark. (1987) da
fik­
yüksek basınç-derin dondurucu tekniği ya da bir
sasyonların. paratiroid hücrelerinde volümün art­
mikrodalga kaynağı ile sitimule edilen sığır ve sıçan
masına,
paratiroidlerinin immersiyon fiksasyon metodu ile
fometrik
analizler,
hücre
mikrodalga
membranları
ile
artırılmış
ve
granüllü
Şekıl 1. Mı'Krodalga ışınımı ile artınlmış fiksasyon yöntemiyle tespit edilen preparatlaıdakı paratırold
hOcrelennın ışık mıkroskopik görOnomı:ı. O: Oniform hOcre, a: açık hOcre, k: koyu hOcre (To­
luidin mavisi x 480)
136
likrodıılga kullanımı Ilc tesbit edilmi� sıçun paratirold dokularının ışı k
ve
clcktron ...
Şekıl 2 Mıkrodalga ııtınımı de artınlmış fıksuyon yöntemiyle tespıt edılen paratirold do­
kusunun ınce yapı dOzayındeki görunumil 0: uniform hucre (EM x 2500).
Şekıl 3. Mıkrodalga ışınımı ile artınlmış fıksasyon yöntemıyle tespit edilen paratıroid do·
kusuna aıt bır görünüm. o� az hOcre zan katiantısına sahip Oniform hücreler. ç: dü­
zenli şekılli oval çekirdek. ger: kısmen cilate granOIIO endoplazmik retıkulum sis·
temalan, m: krista yapılan dejenere mıtokondriyonlar, okbaşı: dar hücreler arası
mesafe (EM x 9800).
137
KANTIR. KAIIVI.- l'l. Kr\RA()'l, �IRMAI
1
Ştıkıl
4
Immersıyon lıksasyon yontamıyle ıospıı edılmış preparatlarda sıtopıazmaıan
farldı yogunlukta boyanan hOcreler u· unıform hucre, a: oçık hucre, k: koyu
hucre,(Toluıdın mavisi. x 480)
Şekıl
5
Immersıyon fıksasyon yontamtyle tespıt edllmış paratıroıd dokusunun ınce yapı
duzeyınclekı görünomu O· üniform hOcre, a· açık hOcre, k: koyu hucre. ç: çe­
kirdek. ok: çok fazla hucr e zarı katıantısına sahıp koyu hOcre, okbaşı. genış huc­
reler arası mesafe (EM x 2500).
138
.
Mikrodalga kullanıını ilc tesbit edilmiş sıçan paratiroid dokularının ışık ve clcktron...
Şekıl 6. Immersiyon fiksasyon yöntemıyle tespıt edilmiş paratıroid dokusunun daha
büyük büyütmedeki göronümü. ç: düzensiz şekilli çekirdek, ü: üniform hücre, a:
açık hücre, okbaşı: geniş hücreler arası mesafe, ger: granOIIO endoplazmik re­
tikulum, m: mitokondıiyon (EM
x
5600).
incelenmesinde, farklı hücre tiplerinin oluşmadığını
Berghdal, L. and Boquist, L.
gözlemişlerdir.
hology in Normal Dogs. Pathol. Eur.
Bu çalışmada da, immersiyon fiksasyon me­
Boon, M. E.
toduyla sıçan paratiroidlerinden hazırlanan pre­
,
(ı 973). Parathyroid Morp­
8, 95-103.
Kok, L. P. and Ouwerkerk-Noordam E.
(ı 986). Microwave Stimulated Diffusion for Fast Pro­
cessing ol Tissue:Reduce d Dehydrating, Clearing and
paratlarda gözlenen farklı tip hücre formlarının, mik­
rodalga kaynağı ile artırılmış fıksasyon yönteminde
lmpregnating Times. HistopathaL ı O,
nadir
Capen, C.C.
görüldüğü
saptanmıştır.
Ayrıca,
mik­
rodalgalama yönteminin ince yapı düzeyinde de,
303-309.
(1980). Parathyroid Hormone, Calcitonin,
and Cholecalciferol: The Calcium Regulating Hormones.
immersiyon yöntemir:ıe yakın sonuçlar verdiği göz­
In:
lenmiştir. Bununla birlikte, mikrodalga ışınımı ile ar­
rodu.ctions;
McDonald,
Veterinary
Endocrinology
and
Rep­
3 rd ed., 62-ı14, Lea and Febigger, Phi­
ladelphia.
tınlmış fiksasyonda gözlenen dilate olmuş granü11ü
endoplazmik retikulum ve mitokondriyonların var­
Emura, S., Shoumura. S., lshizaki, N., Yamahira, T., lto,
lığı, çalışmada kullanılan mutfak tipi mikrodalga fı­
M. and lsono, H.
rında ısı ölçümlerinde yapılan hata sonucu ola­
rathyroid Glands in Golden Hamsters of Different Ages,
bileceği sonucuna varılmıştır.
with Special Reterence to the Frequency of Lipid. Acta
Anat.
133, 96-101.
Feirabend, H. K. P. , Ploeger,S. ,Kok, P and Choufoer,
Kaynaklar
H.
(1992). Does Microwave lrradiation Have Other Than
Thermal
Altenahr, E. and Leonhardt, F.
(1988). Effects of Starvation on the Pa­
Effects on Histological Staining of the Marn­
malian CNS? Eur. J. Morphol.
(1 972). Suppression of
30, 312-327.
Parathyroid Gland Activity by Magnesium: Morphometric
Hopwood, D. Miline, G. and Pentson, J.
Ultrastruc\ural lnve_stigation. Virchows Arch. A. Pathol.
parison of Microwaves and Heat Alone in the Preparation
Anat.
of Tissue for Electron Microscopy. Histochem. J.
355, 297-308.
Balaton, A.
22,
358-364.
(1987). Applicatons des Micro-Ondes Dans
les Techniques Histologiques. Ann. Pathol. 7,
(1990). A Com­
Hopwood,
242-245.
ı39
0., Yı!aman, G.
and Milne, G.
(1 988). Oif-
KANTER. KAIIVt:<.:l. KARAÜ:t� SIRMAIJ
ferentıatıng the Efiacts of Mıcrowave and Heat on nssue
Martı. R. Wıld, P., Sehraner, E . M , Müller, M. and Moor.
Proteıns and Their Crossllnklng By Formaldehyde. His­
H. (1987). Parathyrold Ultrasıructure After Aldehyde Fi­
tochem. J. 20. 341·3A6.
xation, High Pressure Freezıng, or Microwave lrradiation.
R W.
Horobın.
and Flemmıng,
L
shooting' Microwave Accelerated Procedures
in His·
tology and Histochemistry:Understanding and
Dealing
wıth Artefacts, Errors and
J. Histochem. Cytochem. 35, 1415-1424.
(1990). eTrouble­
Hazards.
Histochem.
Meuten,
GV
J.
Syncytal
Cells
in
Canine
Parathyroıd
Roth, SJ and Capen, C.C. (1974). Ultrastruetural and
Kahvecı. Z.
1993).
Değişik Dokuların Fiksasyonunda
Functıonal Correlations
Mıkrodalganın Kullanımı. Doktora Tezi, Bursa.
Stute, H.. Lubcke,
K.
(1988,
Rapd M crowave Fixaıion a Cofl'lleraırve Morp·
hometnc Study. Hıstochem
Roth, S.,.
and Wazınskı. U
J
ıhe Rat Parathyroid Gland 1n Organ Culture.
Setoguti. T.
Staining of Cryostat
42, tOt-105.
Tıss . Res.
Shoumura, S.. lwasaki, Y.. lshizaki. N.. Emura. S., Ya­
toprocessıng wıth the Mıcrowave Oven: an Update. His­
roterenol on the Fine
Structure of the Hamstef Pa­
rathyroid Gland. Hıstol. Histopathol. 3, 225-233.
Larson. H.O. Lorentzon.
R and Boquıst, L. (1984).
Sıructure of Paraıhyroid Glands. as Revealed by
Umar, M.H
.•
Dif­
Ü ve Falakalı. S.
Uygulanması. Ege Unıversıtesı Tıp Fakültesi
Electron Microscopic Study ın Untreated Mongolıan Ger­
Derg. 28
(4),1773-1780.
bıls. Ceıı nss Res 235. 51 ·58.
Umar, M.H., Pabuçcuoglu, H.U. and ÖCal, Ş.D. (1990).
Mıcrowave lrradiatıon ın His-
Histoteknikte Modıltye Mıkrodalga Metodu. Türk PatolOJI
topathology Pathol. Ann 2 (23), 213-233.
Daymon M. E and Mlllion,
Pabuçcuoglu, H.U., lrıce,
(1989). Mikro Elektromagnetık Dalgalann Histotekniğe
terenı Methods of Fixation. A Quantıtative üght and
Derg 6 (2). 6770.
J
(1985)
Wıld. P. (1980). Correlatrve Light and Electron Mıc­
Mıcrowave lrradatton as a Form of Fıxation for Lıght and
Eleetron Microseopy
(1988). Bectron
mahıra. T . lıo. M. arıd lsona. H. (1988). Effects of lsop­
tochem. J. 20. 323-328.
•
Shln. M.
radatıon in the Rat Parathyroid Gland. Cell
Kok. L. P., Vısser. P.E. and Bonn, M.E. (\988). H'ıs·
Leong. A.S.Y
lnoue, Y. and
251, 531-539.
roscopy. Mıcrosc. 158, 291·322.
(1 988)
Lab. lnvest.
Microscopic Studies and the Acc:erelation of Their Deg­
L P. and Boon. M. E. (1990). Microwaves for Mic­
Leong. A.S Y.
Re­
15, 1187-1211
Kennedy. A and Foulıs, A K (1989). Use of Mıcrowave
J. Clin. Pathol.
and Raishz LG (1966). The Course and
versıb�ıty or the Calcıum Elfeel on the Ultrastructure of
J 20.347-352.
Oven lfl'llroves Morphology and
of the Paraıhyroid Gland lnv.
Rev Exp. Palhol. 13, 161·221
Kayser
Kok.
.•
Glands Veı. Paıhol 21, 463-468.
22,371-376
Sectıons.
D.J Capen, C.C., Thompson, K.G. and Segre,
(1984).
roscopıc Study of Parathyroid Glands in
J. Palhol 146, 313-321.
Dogs of
Dıf
lereni Age Groups. Aeta Anat. 108, 340·349.
Lever. J. D. (1957). Fine Structural Appearences in the
Wild, P . Gloor, S. and Vetsch, E. (1985). Quantitatıve
Rat Parahtyroid J Anal. 91. 73 81
Aspects of Membrane Behaviour in Rat Parathyroid Cells
Login. G. . R. (1978).
After Depressıon or Elevaııon ol Serum Calcium. Lab. In·
Mıcrowave Fixatıon Versus For­
vest. 52. 490-496.
malin Fixaııon ol Surgical and Autopsy nssue Am. J.
Med. Techno!. 44, 435·437.
Logın,
G.R
and
Dovarak.
Wıld, P
.•
A.M. (1985).
Krahenbüht and Schraner. E.M. (1989)
tency ol Mıcrowave lrradiation
Microwave
Po
Durıng Fıxation for Elect­
Energy Fıxaııon Provıdes Exeeliant Preservatıon of Tıs·
ron Mıcroscopy. Hıstochem. 91, 213·220.
sue
Wıld. P. and Schraner. E. M (1989). Quanııtaııve As­
Cells and Anttgens for Ught and Electron Mıc­
•
roseopy. Hıstochem. J. 20, 373-387.
Login. G.R. and Dovorak, A.M. (1988). Microwave
Enhanced Fıxatıon ol Parathyroids. Hıstoclıem 92. 69-72.
Fı­
xaılon Provıdes Exeelieni Preservaııon of nssue. Cells
and Antıgens for ügth and Electron Mıcroscopy
.
sessment of Cellular Changes Provoked by Microwave
Wild, P. and Schraner, E.M. (1986): Ultrastructural Al­
teraııons tn Mammalıan Parathyroid Glands lnduced by
HtS
tochem. J. 20. 373-387.
Fixation Acta Anat. 126. 87·96.
140

Benzer belgeler